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非离子去污剂提高双向电泳银染后胶内酶切的效率  
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【英文篇名】 Non-ionic detergent n-dodecyl-β-D-maltoside improves the in-gel digestion of 2-D gel electrophoresis after silver staining
【下载频次】 ★★
【作者】 王鸿丽; 刘锋; 赵永强; 杨松成; 李萍;
【英文作者】 WANG Hong-li; LIU Feng; ZHAO Yong-qiang; YANG Song-cheng; LI ping National Center of Biomedical Analysis; Beijing 100850; China;
【作者单位】 国家生物医学分析中心;
【文献出处】 军医进修学院学报 , Journal of Chinese PLA Postgraduate Medical School, 编辑部邮箱 2011年 12期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 银染; 胶内酶切; 正十二烷-β-D-麦芽糖苷; 质谱;
【英文关键词】 silver stain; in-gel digestion; n-dodecyl-β-D-maltoside; mass spectrometry;
【摘要】 目的改进二维凝胶电泳银染色后的胶内酶切方法,提高蛋白质的鉴定率。方法应用超高效纳升液相色谱-电喷雾串联质谱(HD-MS),对改进方法 (酶切中加入非离子去污剂正十二烷-β-D-麦芽糖苷)和原有方法进行比较。结果 2D胶上的10个蛋白质斑点中的蛋白质用两种方法均得到明确的鉴定结果,但60%的蛋白质用改进方法鉴定的氨基酸序列覆盖率较原有方法明显提高。结论改进后的方法简便,适用于凝胶为基础的蛋白质组学研究。
【英文摘要】 Objective To improve the in-gel digestion of 2-D gel electrophoresis after silver staining.Methods Modified method(adding non-ionic detergent n-dodecyl-β-D-maltoside in-gel digestion) and original method were compared by nanoUPLC-electrospray ionization tandem mass spectrometry(HD-MS).Results Ten protein spots on 2-D gel were identified using the two methods.However,the amino acid sequence coverage in 60% proteins identified using the modified method was significantly higher than that identified using the o...
【基金】 国家科技部创新方法工作专项项目(2010IM030300)~~
【更新日期】 2012-01-04
【分类号】 R341
【正文快照】 蛋白质组学研究已成为生命科学领域继基因组研究之后最重要的领域,采用二维凝胶电泳对蛋白质混合物样品进行分离,然后用生物质谱鉴定,是目前蛋白质组学研究中常用的技术方法之一[1-2]。硝酸银染色比考马斯亮蓝染色可获取更多的样品信息,但硝酸银染胶内酶切由于蛋白量相对较低及

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