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牛粪便微生物总DNA提取方法的优化

The Optimization of Methods for DNA Extraction of Total Microorganisms from Cow’s Feces

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【作者】 刘虎虎李亚丹薛高尚陈东明田云卢向阳

【Author】 LIU Hu-hu1,2, LI Ya-dan1,2, XUE Gao-shang1,2, CHEN Dong-ming1,2,3,TIAN Yun1,2, LU Xiang-yang1,2(1.Hunan Agricultural Bioengineering Research Institute,Changsha,Hunan 410128;2.College of Bioscience and Biotechnology,Hunan Agricultural University,Changsha,Hunan 410128;3.Department of Life Science,Huaihua University,Huaihua,Hunan 418000)

【机构】 湖南省农业生物工程研究所湖南农业大学生物科学技术学院怀化学院生命科学系

【摘要】 采用试剂盒提取法、冻融-CTAB法、CTAB-SDSⅠ法与CTAB-SDSⅡ法四种方法提取牛粪便总DNA,并从纯度、颜色与提取量等方面进行评价分析.实验表明,CTAB-SDSⅡ法提取的总DNA颜色透明、DNA纯度(A260/A280)为1.930±0.433、DNA提取量(μg/g)为19.870±0.433.因此,CTAB-SDSⅡ法是一种比较适合牛粪便微生物总DNA的提取方法.

【Abstract】 The metagenomics is an important approach to develop and utilize the uncultured microorganisms.Meanwhile,the quality of DNA from microorganisms is an important guarantee to construct the metagenomic library.Four different methods including DNA isolation kit method,freeze thawing-CTAB method,CTAB-SDSⅠ method and CTAB-SDSⅡ method were used to extract DNA from cow’s feces.Through the analysis of the purity,color and amount of DNA extraction,the results of CTAB-SDSⅡ method were as follows:the color was clear,the purity(A260/A280)of DNA was 1.930±0.433,the amount of DNA extraction(μg/g)was 19.870±0.433.Therefore,the CTAB-SDSⅡ method was regarded as one suitable way to extract total DNA from cow’s feces.

【关键词】 牛粪微生物DNA提取优化
【Key words】 cow’s fecal microorganismsDNA extractionoptimization
【基金】 国家“十一五”科技支撑计划(2008BADC4B08);科技部国际科技合作项目(2010DFA62510);教育部2009年度“长江学者和创新团队发展计划”(IRT0963);2008年和2009年湖南省高校科技创新团队支持计划;湖南省研究生科研创新项目(CX2010B287)
  • 【文献出处】 怀化学院学报 ,Journal of Huaihua University , 编辑部邮箱 ,2011年05期
  • 【分类号】Q93-33
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】468
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