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彭泽鲫葡萄糖激酶基因全长cDNA克隆及表达分析  
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【英文篇名】 Cloning and Expression Analysis of a Full-length cDNA Encoding Glucokinase from Pengze Crucian Carp (Carassius auratus var. Pengze)
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【作者】 程汉良; 姬南京; 彭永兴; 申欣; 吴陈晨; 许建和; 董志国;
【英文作者】 CHENG Hanliang JI Nanjing PENG Yongxing SHEN Xin WU Chenchen XU Jianhe DONG Zhiguo(Jiangsu Key Laboratory of Marine Biotechnology; Huaihai Institute of Technology; Lianyungang 222005; China);
【作者单位】 淮海工学院江苏省海洋生物技术重点实验室;
【文献出处】 动物营养学报 , Chinese Journal of Animal Nutrition, 编辑部邮箱 2011年 07期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 彭泽鲫; 葡萄糖激酶; 全长cDNA; 组织表达;
【英文关键词】 Pengze crucian carp(Carassius auratus var.Pengze); glucokinase; full-length cDNA; tissue expression;
【摘要】 本试验采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆获得了彭泽鲫(Caras-sius auratusvar.Pengze)葡萄糖激酶(GK)基因全长cDNA序列。结果表明,该cDNA全长2 050bp,含1个1 431bp的开放阅读框(ORF),编码476个氨基酸,GK蛋白计算分子量为53.78ku,等电点为5.14。彭泽鲫GK氨基酸序列的ATP结合位点、葡萄糖结合位点、己糖激酶标签序列、N-连接糖基化位点、细胞黏附序列和糖胺聚糖黏附位点等主要功能位点与其他脊椎动物相比基本保守。彭泽鲫GK氨基酸序列与建鲤、人和鼠GK氨基酸序列相似百分比分别为98.1%、79.8%和79.1%。以β-actin为内标,采用半定量RT-PCR方法对GK基因在彭泽鲫大脑、白肌、脾脏、肠系膜脂肪和肝胰脏各组织中的表达进行了研究。结果表明,GK基因主要在肝胰脏中表达;在脾脏、肠系膜脂肪和大脑中也检测到微量表达,但表达量显著低于肝胰脏(P<0.05);白肌中没有检测到GK基因表达。
【英文摘要】 A full-length cDNA coding glucokinase(GK) was cloned from Pengze crucian carp(Carassius auratus var.Pengze) by RT-PCR and rapid amplification of cDNA ends(RACE) methods.The cDNA sequence obtained is of 2 050 bp length with a 1 431 bp open reading frame(ORF) encoding 476 amino acids.The GK protein has a calculated molecular weight of 53.78 ku and isolectric point of 5.14.The main domains of GK,such as ATP-binding domain,glucose-binding amino acids,hexokinases signature,N-linked glycosylation sites,cell attac...
【基金】 江苏省自然科学基金(BK2008191); 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室开放基金(J2010010); 江苏省海洋生物技术重点实验室开放基金(2009HS15); 江苏省高校自然科学研究重大项目(10KJA240002)
【更新日期】 2011-07-29
【分类号】 Q785
【正文快照】 葡萄糖激酶(g lucokinase,GK,EC2.7.1.1)是糖代谢的关键酶,催化葡萄糖磷酸化生成6-磷酸葡萄糖(g lucose6--phophate,G6--P),这是糖元合成和糖酵解的第1步反应[1]。GK属己糖激酶(hexokinase,HK)家族成员之一,哺乳动物己糖激酶有同工酶Ⅰ~Ⅳ型,其中,Ⅰ~Ⅲ型主要存在于肝外组织,其

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