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表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用  
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【英文篇名】 Construction of Cre recombinase expression vector Cre-pCEP4 and its application in Cre/loxP system
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【作者】 周杨; 朱建国; 唐小春; 闫森; 宋娜; 张明军; 李莉; 欧阳红生; 逄大欣;
【英文作者】 ZHOU Yang; ZHU Jian-guo; TANG Xiao-chun; YAN Sen; SONG Na; ZHANG Ming-jun; LI Li; OU-YANG Hong-sheng; PANG Da-xin(Jilin Provincial Key Laboratory of Animal Embryo Engineering; Institute of Animal and Veterinary Medicine; Jilin University; Changchun 130062; China);
【作者单位】 吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室;
【文献出处】 吉林大学学报(医学版) , Journal of Jilin University(Medicine Edition), 编辑部邮箱 2011年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 Cre-pCEP4; Cre/loxP重组系统; 猪胚胎成纤维细胞; MCF-7细胞系;
【英文关键词】 Cre-pCEP4; Cre/loxP system; porcine embryonic fibroblasts; MCF-7 cell line;
【摘要】 目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据。方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达。而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达。结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段。
【英文摘要】 Objective To construct the Cre rebombinase expression vector and identify its function of recognizing loxP sites and provide the basis for establishment of the animal models of human diseases.Methods The recombinant vectors Cre-pCEP4 and pStop-eGFP were constructed.The MCF-7 cells and porcine embryonic fibroblasts(PEF) were transfected by Fugene HD.The expression of eGFP was analyzed by fluorescence microscope.Results The recombinant vectors Cre-pCEP4 and pStop-eGFP were constructed successfully and they we...
【基金】 国家自然科学基金资助课题(30771582,130871841)
【更新日期】 2011-04-26
【分类号】 R346
【正文快照】 DOI:CNKI:22-1342/R.20110309.1347.001网络出版时间:2011-03-09 13:47网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/22.1342.R.20110309.1347.001.html随着转基因动物研究的兴起,转基因动物作为人类疾病动物模型的研究得到了广泛的重视。人类许多疾病的发生都与其组织或细胞

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