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鹅细小病毒NS2基因的原核表达及抗原性检测

Prokaryotic expression of goose parvovirus NS2 gene

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【作者】 邢明伟于天飞马波王君伟

【Author】 XING Ming-wei1,2, YU Tian-fei1,3, MA Bo1, WANG Jun-wei1(1. Department of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China; 2. College of Wild Life Resources, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China; 3. College of Life Science and Engineering, Qiqihar University, Qiqihar 161006, China)

【机构】 东北农业大学动物医学学院东北林业大学野生动物资源学院齐齐哈尔大学生命科学与工程学院

【摘要】 为原核表达鹅细小病毒(GPV)NS2蛋白,本研究利用特异性引物扩增获得GPV的H1分离株NS2基因,将其克隆于pMD18-T载体后进行序列测定。并将NS2基因亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1中,获得重组质粒pGEX-NS2。该质粒转化于感受态菌BL21(DE3)plysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析,表达的重组蛋白约为75ku左右。经过亲和层析方法获得了纯化的重组NS2蛋白。Westernblot和Dot-ELISA鉴定结果表明,表达的重组NS2蛋白可以与GPV阳性血清发生特异性反应。

【Abstract】 The goose parvovirus GPV NS2 gene was amplified by PCR and cloned into vector pGEX-6P-1. The recombinant plasmid pGEX-NS2 was transformed into BL21(DE3) pLysS E.coli and induced with IPTG. The expressed NS2 fusion protein had a MW of 75 ku and was purified by GST affinity chromatography purification system. Western blot and Dot-ELISA showed that the purified NS2 protein could be recognized by GPV positive serum.

【关键词】 鹅细小病毒NS2基因原核表达纯化抗原性
【Key words】 GPVNS2 geneprokaryotic expressionpurificationantigenicity
【基金】 黑龙江“十五”攻关项目(GB01B503202)
  • 【文献出处】 中国预防兽医学报 ,Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine , 编辑部邮箱 ,2010年02期
  • 【分类号】S852.65
  • 【被引频次】14
  • 【下载频次】170
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