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人CYP19基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建

Construction of Luciferase Report Gene Vector Containing Human CYP19 Promotor

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【作者】 邵喜英; 陈占红; 黄健; 雷蕾; 冯建国; 苏丹; 王晓稼;

【Author】 SHAO Xi-ying,CHEN Zhan-hong,HUANG Jian,et al.(Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China)

【机构】 浙江省肿瘤医院; 浙江省肿瘤研究所;

【摘要】 [目的]克隆人CYP19基因启动子PⅠ.3(-345~-234bp)、PⅡ(-517~-278bp)和PⅠ.7(-299~+81bp)片段,构建启动子荧光素酶报告基因载体。[方法]采用生物合成PⅠ.3(-345~-234bp)、PⅡ(-517~-278bp)和PⅠ.7(-299~+81bp)区域基因片段,通过HindⅢ和KpnⅠ酶切连接到pGL3-Basic载体上。[结果]测序验证pGL3-Basic-PⅠ.3,pGL3-Basic-PⅡ和pGL3-Basic-PⅠ.7构建成功。[结论]pGL3-Basic-PⅠ.3,pGL3-Basic-PⅡ和pGL3-Basic-PⅠ.7荧光素酶报告基因载体的成功构建,为进一步研究CYP19基因组织特异性表达奠定基础。

【Abstract】 [Purpose] To construct luciferase report gene vector containing human CYP19 promotor PⅠ.3(-345--234bp),PⅡ(-517--278bp)and PⅠ.7(-299-+81bp).[Methods] PⅠ.3(-345-234bp),PⅡ(-517--278bp)and PⅠ.7(-299-+81bp) were amplified by biosynthesis,and inserted into the luciferase report gene pGL3-Basic vector with restriction endonuclease HindⅢ and Kpn Ⅰ.[Results] pGL3-Basic-PⅠ.3,pGL3-Basic-PⅡ and pGL3-Basic-PⅠ.7 were confirmed by DNA sequencing.[Conclusion] The human CYP19 promotor luciferase reporter gene vectors are constructed successfully,which establishes the base for the further research of CYP19 tissue-specific expression mechanism.

【关键词】 CYP19基因; 启动子; 荧光素酶;
【Key words】 CYP19 gene; promotor; luciferase;
【基金】 浙江省自然科学基金(Y206856);浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项基金(2005QN002);浙江省医药卫生科学研究基金资助项目(2007B021)
  • 【文献出处】 肿瘤学杂志 ,Journal of Oncology , 编辑部邮箱 ,2010年11期
  • 【分类号】R737.9
  • 【被引频次】7
  • 【下载频次】267
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