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猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在毕赤酵母中的表达

Expression of Transmissible Gastroenteritis Virus of Swine Spike Gene B and C Antigen Sites in Pichia pastoris

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【作者】 于天飞王君伟胡森靳淼

【Author】 Yu Tianfei1,2 Wang Junwei1 Hu Sen1 Jin Miao1(1 Department of Veterinary Medicine,Northeast Agriculture University,Harbin 150030;2 College of Life Science and Engineering,Qiqihar University,Qiqihar 161006)

【机构】 东北农业大学动物医学院齐齐哈尔大学生命科学与工程学院

【摘要】 采用基因重组的方法构建了含有猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段的巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris分泌型表达载体pPIC9K-ts,经线性化后采用电穿孔法将其导入毕赤酵母GS115中,大量筛选后获得高效表达外源蛋白的毕赤酵母工程菌株GS115/pPIC9K-ts。表达蛋白经Dot-ELISA检测具有良好的抗原性。本研究为TGE的血清学检测方法的建立提供了必要的物质基础。

【Abstract】 A DNA fragment coding for TGEV spike gene B and C antigen sites was cloned into P.pastoris expression vector pPIC9K for extracellular expression in P.pastoris by gene recombination.The resulted recombinant plasmid pPIC9-ts was then linearized and transformed into P.pastoris GS115 by electroporation.The ts gene was integrated into the genome of P.pastoris through homologous recombination and an expression strain,named GS115/pPIC9K-ts,was obtained.Dot-ELISA showed that the recombinant protein possessed favourable antigenicity.This research provided essential material foundation for establishment of TGE serology diagnostic method.

【基金】 黑龙江省“九五”攻关课题(G00B03021)
  • 【文献出处】 生物技术通报 ,Biotechnology Bulletin , 编辑部邮箱 ,2010年05期
  • 【分类号】S852.65;Q78
  • 【被引频次】4
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