竞争性RT-PCR在定量分析沙门菌acrA基因mRNA表达中的应用

【摘要】 应用竞争性RT-PCR技术测定mRNA的表达量,具有高灵敏度、快速、准确、简单等优点,它是Gilland等人于1990年首先发明的,现在已经得到了广泛应用。Girud等人研究表明,沙门菌存在由acrAB外输泵介导的耐药机制,外输泵的活动性与耐药水平有一定的相关性。因而,通过对外输泵表达的mRNA水平进行了定量检测,可以分析外输泵的活动性,进而了解沙门菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。1材料与方法1.1菌株质控菌株:雏鸡沙门菌NCTC5776,购自中国药品生物制品检定所。试验菌株:临床分离沙门菌氟喹诺酮类耐药株37、38、42、55、60、61、68、217和251。1.2内标和外标的建立根据试验菌更多还原