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香蕉RAPD反应体系的建立

The Establishment of RAPD Reaction Program of Banana

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【作者】 刘金福潘东明代立春陈清西庄西卿李英豪

【Author】 Liu Jinfu1,2, Pan Dongming1,3, Dai Lichun2, Chen Qingxi1, Zhuang Xiqing4,Li Yinghao2(1Horticμlture College of Fujian Agricμlture and Forestry University, Fuzhou 350002;2Forestry College of Fujian Agricμlture and Forestry University, Fuzhou 350002;3Institute of Storage Science and Technology for Hortic μltural Product,Fujian Agric μlture and Forestry University, Fuzhou 350002;4Fujian Tropical Crop Scientific Institute, Zhangzhou Fujian 363001)

【机构】 福建农林大学园艺学院福建农林大学林学院福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所福建省热带作物科学研究所

【摘要】 利用改良的CTAB方法从香蕉叶片中提取高质量的DNA。在参考一般RAPD分析反应程序的基础上,经过反复试验,确定适合香蕉PCR扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min;38℃退火1min;72℃延伸2min;循环45次;最后72℃延伸2min。PCR扩增的体系(总体积25μl)为:模板DNA20ng,dNTP200μmol/L,10×PCRBuffer2.5μl,引物0.20μmol/L,Taq酶0.75U,ddH2O17.85μl。

【Abstract】 Using the improved method of CTAB,high purity DNA was obtained from banana leaves.Based on the common RAPD reaction program and adjusting experiments,the optimal amplification program was described as follows:94 ℃ for 5 min;45 cycles at 94 ℃ for 1 min,38 ℃ for 1 min and 72 ℃ for 2 min;72 ℃ for 2 min at last. PCR system(25 μl total volumes)contains:20 ng of genomic DNA,200 μmol/L of dNTP,2.5 μl of 10×PCR Buffer,0.20 μmol/L of primer,0.75 U Taq DNA polymerase and 17.85 μl of ddH2O.

【关键词】 香蕉模板DNARAPD
【Key words】 bananatemplate DNARAPD
【基金】 福建省科技重大专项果茶专项“闽台特色果茶良种选育研究及产业化”(2004NZ02);福建省科技厅重点项目“福建省香蕉种质资源RAPD分析研究与新品种引”(2005N004)
  • 【文献出处】 中国农学通报 ,Chinese Agricultural Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,2009年16期
  • 【分类号】S668.1
  • 【被引频次】9
  • 【下载频次】105
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