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CD133~+结直肠癌SW480细胞系克隆亚系的建立

Construction of CD133~+ sublines of colorectal cancer cell line SW480

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【作者】 李广秋刘超郝俊梅李建明邓永键丁彦青

【Author】 LI Guang-qiu,LIU Chao,HAO Jun-mei,LI Jian-min,DENG Yong-jian,DING Yan-qing(Department of Pathology,Southern Medical University,Nanfang Hospital,Guangzhou 510515,China)

【机构】 南方医科大学基础医学院病理学系南方医院病理科

【摘要】 目的建立CD133+结直肠癌SW480细胞系克隆亚系。方法通过有限稀释法进行单细胞克隆培养,从结直肠癌SW480细胞系48个单细胞孔中培养出8个单细胞源性细胞亚系(编号Y1~8)。对所建立的细胞亚系进行RT-PCR、流式细胞分析及免疫细胞化学筛选CD133+的细胞亚系(Y6、Y2);并通过MTT法体外增殖实验、划痕实验、体外运动实验和皮下成瘤实验,比较CD133+之间及与CD133-单细胞源性细胞亚系的生物学特性。结果筛选出CD133+单细胞源性细胞亚系2个(Y2、Y6),CD133-单细胞源性克隆6个(Y1、Y3、Y4、Y5、Y7、Y8)。结论通过单细胞克隆培养建立CD133+结直肠癌SW480细胞亚系,为下一步结直肠癌转移机制研究提供相关的单细胞源性细胞亚系。

【Abstract】 Objective To screen CD133+ single-cell derived sublines of colorectal cancer cell line SW480.Methods 8 single-cell derived sublines(No.Y 1~8) were screened from 48 single-cell in colorectal cancer cell line SW480 by limited-dilution method.The CD133+ cell sublines were detected by RT-CR,flow cytometry,and immunohistochemistry.Moreover,their biological features were compared with MTT assay,streak experiments,in vitro motility and subcutaneous tumorigenesis.Results There were two single-cell derived sublines(Y2、Y6) were positive for CD133+,and the others were negative for CD133.Conclusion CD133+ cell subline of single-cell derived sublines of colorectal cancer cell line SW480 is constructed by monoclone culture,and it may be importance of understanding of mechanisms for colorectal cancer metastatasis.

【关键词】 有限稀释法克隆亚系结直肠癌
【Key words】 Limited-dilution methodCloneSublineColorectal cancer
【基金】 国家自然科学基金(30670967、30770977);广东省自然科学基金重点项目(5200512);广州市科技计划项目(2007Z3-E4011)
  • 【文献出处】 诊断病理学杂志 ,Chinese Journal of Diagnostic Pathology , 编辑部邮箱 ,2009年02期
  • 【分类号】R735.3
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