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药用植物白术ISSR-PCR反应体系的正交优化研究
Study on Optimization of ISSR-PCR Reaction System of Atractylodes macrocephala Koidz by Orthogonal Design
【摘要】 采用正交试验设计的方法,对白术ISSR-PCR反应体系进行优化,确立了适合于白术的ISSR-PCR反应的最佳体系,即在25μL反应体系中,10×buffer 2.5μL,Mg2+3 mmol/L,Taq酶0.75U,模板200 ng,dNTP 0.3mmol/L,引物0.5μmol/L,通过梯度PCR试验得到相应引物的最佳退火温度为55.0℃。
【Abstract】 The orthogonal design was used to optimize ISSR-PCR reaction system of Atractylodes macrocephala Koidz.A suitable ISSR-PCR system was established and a total volume of 25 μL ISSR-PCR system consisted of 10×buffer 2.5 μL,Taq DNA polymerase 0.75U,Mg2+3 mmol/L,template DNA 200 ng,dNTP 0.3 mmol/L,primer 0.5 μmol/L.The optimal annealing temperature of ISSR-PCR for Atractylodes macrocephala Koidz reaction was proposed by gradient PCR.
【关键词】 白术;
ISSR-PCR;
体系优化;
正交试验设计;
梯度PCR;
【Key words】 Atractylodes macrocephala Koidz; ISSR-PCR; system optimization; orthogonal design; gradient PCR.;
【Key words】 Atractylodes macrocephala Koidz; ISSR-PCR; system optimization; orthogonal design; gradient PCR.;
【基金】 浙江省重点实验室项目;新疆维吾尔自治区教育厅重点项目(XJEDU2004G07)
- 【文献出处】 新疆农业科学 ,Xinjiang Agricultural Sciences , 编辑部邮箱 ,2009年01期
- 【分类号】S567.233
- 【被引频次】4
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