运用原子力显微镜对急性分离平滑肌细胞高分辨成像及微观力学性质研究

【摘要】 目的:在接近生理状态下对急性分离的微动脉平滑肌细胞进行微观力学研究,将非常有助于多种心血管疾病深入研究。原子力显微镜(AFM)它通过控制并检测针尖-样品间的相互作用力,不仅可以实现样品表面形貌的纳米尺度上的高分辨成像,而且可以进行分子间相互作用力的检测。然而AFM在运用过程中,样品的固定是关键问题,本研究建立一种新的固定细胞的方法进行刚分离的平滑肌细胞高分辨成像,以及测量平滑肌细胞在药物刺激后微区力学性质的变化。方法:运用复制模塑法制备聚二甲基硅氧烷(PDMS)微柱结构。用多聚左旋赖氨酸涂铺PDMS微阵列模板表面。采用木瓜酶和胶原酶两步酶消化法快速分离正常大鼠的肠系膜动脉平滑肌细胞,将细胞悬液更多还原