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抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义
【摘要】 目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体(mAb),用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵(SAS)纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗,分别包被ELISA板及作为酶标mAb,建立双mAb夹心ELISA法。结果经细胞融合、筛选、克隆化,获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选出2株mAb:7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法,检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1μg/L。结论获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb,建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法。
【关键词】 人类免疫缺陷病毒-1；
HIV包膜蛋白质gp41；
单克隆抗体；
双抗体夹心ELISA；
【基金】 河北省科技攻关项目(02276401D);河北省卫生厅科技攻关项目(02001)。
- 【文献出处】 山东医药 ,Shandong Medical Journal , 编辑部邮箱 ,2009年19期
- 【分类号】R512.91;R446.6
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