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磁螺菌MSR-1磁小体缺失突变株NM21 Tn5侧翼序列的克隆及功能分析
【摘要】 利用mini-Tn5 lacZ2对磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense)MSR-1进行转座插入突变,获得磁小体缺失突变株NM21.通过锚定PCR从NM21中克隆出Tn5插入位点的侧翼序列,获得长3073bp的DNA片段,其中含有3个ORF,Tn5插入在ORF1中,互补实验证明该片段与磁小体合成相关.对ORF1编码的蛋白进行同源比较和功能分析,发现ORF1编码的蛋白中部有4个跨膜螺旋,与其同源性较高的序列全部为二价阳离子转运蛋白.BLAST软件分析表明,ORF1编码的蛋白具有COG0053和PRK09509结构域,与FieF和MMT1等二价阳离子转运蛋白家族CDF(cation diffusion facilitator)有相同的结构域,推测其为磁小体膜上Fe2+的转运蛋白,且可能在去除Fe2+对细胞毒害的过程中起着重要作用.
【关键词】 M.gryphiswaldense；
磁小体缺失突变株；
基因克隆；
功能分析；
Fe2+转运蛋白；
【基金】 国家自然科学基金(批准号:30570023);安徽省淮北市科研计划(编号:070114)资助项目
- 【文献出处】 科学通报 ,Chinese Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,2009年07期
- 【分类号】Q93
- 【被引频次】2
- 【下载频次】201