节点文献
水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6的表达及其单克隆抗体的特异性分析
【摘要】 水稻矮缩病毒(RDV)的基因组包含12条双链RNA,其中基因组片段S6编码的非结构蛋白Pns6为该病毒的运动蛋白.在本研究中,在大肠杆菌中表达了N端融合His-tag的重组Pns6蛋白.在低温和低IPTG浓度的诱导后,通过Ni螯合亲和层析进行纯化获得了HisPns6蛋白.稳定性分析表明,HisPns6是一个稳定的蛋白,可耐受37℃下长达24h的处理.纯化的蛋白后续用于单克隆抗体的制备并得到18个杂交瘤细胞株系.使用从感染RDV的水稻叶片中提取的Pns6为样品,以健康水稻总蛋白为对照,通过Western blot法对抗体进行特异性分析,获得了15个阳性抗体.对其进行抗原决定簇分析表明,最敏感的抗原决定簇位于Pns6的C端区域(296~509位氨基酸).该结果与生物信息学预测分析相吻合.
【基金】 国家高技术研究发展计划(批准号:nyhyzx07-051和2007AA021505);农业部专项基金资助项目
- 【文献出处】 中国科学(C辑:生命科学) ,Science in China(Series C:Life Sciences) , 编辑部邮箱 ,2009年08期
- 【分类号】S435.111
- 【被引频次】2
- 【下载频次】140