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广谱拮抗菌B96-Ⅱ的分子鉴定及GFP标记  
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【英文篇名】 Identification of Broad-spectrum Antagonistic Strain B96-Ⅱ and GFP Tagging
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【作者】 郝变青; 马利平; 乔雄梧;
【英文作者】 HAO Bian-qing; MA Li-ping; QIAO Xiong-wu (Shanxi Key Laboratory of Pesticide Science; Shanxi Academy of Agriculture Sciences; Taiyuan 030031; China);
【作者单位】 山西省农业科学院山西省农药重点实验室;
【文献出处】 华北农学报 , Acta Agriculturae Boreali-Sinica, 编辑部邮箱 2009年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 广谱拮抗菌; 分子鉴定; 绿色荧光蛋白; 原生质体转化;
【英文关键词】 Broad-spectrum antagonistic strain; 16S rDNA; GFP; Protoplast transformation;
【摘要】 用PCR方法扩增的广谱拮抗菌B96-Ⅱ的16S rDNA经序列测定和BLAST同源序列比较,结合传统的形态观察、生理生化特征鉴定,确定了B96-Ⅱ分类地位为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。将含有绿色荧光蛋白基因和氯霉素抗性基因标记的大肠杆菌一枯草芽孢杆菌穿梭表达载体(pNW33N-gfp-B96-Ⅱ-N)通过原生质体法转化B96-Ⅱ,获得表达GFP的4株标记菌株,在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光。室内平板抑菌试验结果表明,GFP标记对B96-Ⅱ的广谱抑菌活性没有影响。
【英文摘要】 16S rDNA of broad-spectrum antagonistic strain B96-Ⅱ was amplified by PCR and sequenced.Using BLAST software,comparison results showed B96-Ⅱ was possibly identified as Bacillus subtilis combining its morphological,physiological and biochemical characteristics.In order to construct Escherichia coli-Bacillus shuttle vector containing gfp and B96-Ⅱ self promoter,digested fragments of total DNA of B96-Ⅱ that was digested by Sau3A I were ligated to pNW33N-gfp that was digested by BamH I,and the product was trans...
【基金】 山西省青年基金项目(2007021037); 山西省科技攻关项目(2006031033); 山西省重点实验室开放基金项目(200603021)
【更新日期】 2009-12-17
【分类号】 S476.1
【正文快照】 蔬菜土传病害是由生活在菜田土壤中的病原体如真菌、细菌、线虫和病毒在条件适宜时从蔬菜根部或茎部侵害而引起的病害,且为害程度会随着蔬菜连作年限的增加而逐年加重,造成严重减产甚至绝产,经济损失重大[1]。在防治方面,化学防治和抗病品种目前只对少数土传病害有效,对大多数?

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