免疫印迹法检测人血清IgG g链

【摘要】 1材料和方法1.1材料垂直电泳槽,转移电泳槽(美国BIO-RAD公司);WD-9405B型水平摇床(北京六一仪器厂).1.2方法①原样人血清用生理盐水稀释10倍,人标准IgG蛋白稀释成浓度2mg/L,再分别加等量2×上样品缓冲液混匀.除marker外,全部沸水浴加热5min,稍适离心待上样.②聚丙烯酰胺凝胶配制[1].将十二烷基硫酸钠分别配制成8g/L的分离胶溶液和4g/L的浓缩胶溶液,室温静置聚合.每孔加样20mL,设立marker,空白对照,阳性人标准IgG蛋白对照孔,调电压150V恒压电泳至溴酚蓝刚跑出胶底部.③考马斯亮蓝染色.用2块胶行电泳,用其中1块做考马斯亮蓝染色,另1块做电转印.更多还原