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间接ELISA技术检测近江牡蛎病原—类立克次体

Indirect ELISA Technique for Detection of a Rickettsia-like Organism from Oyster,Crassostrea ariakensis

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【作者】 孙敬锋毕相东吴信忠

【Author】 SUN Jing-feng1,2,BI Xiang-dong1,WU Xin-zhong3(1.Tianjin Key Laboratory of Aqua-Ecology and Aquaculture,Department of Fishery Science,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China;2.College of Life Science,South China Normal University,Guangzhou 510631,China;3.College of Animal Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310029,China)

【机构】 天津农学院水产科学系天津市水产生态及养殖重点实验室华南师范大学生命科学学院浙江大学动物科学学院

【摘要】 以近江牡蛎病原—类立克次体为抗原,制备鼠抗血清,利用辣根过氧化酶标记的羊抗鼠血清(HRP-IgG)为酶标二抗,建立了检测近江牡蛎类立克次体的间接ELISA快速检测方法。结果表明,应用间接ELISA技术检测近江牡蛎类立克次体有较高的灵敏度,最低的检测量为50 ng的全菌抗原蛋白量。同时交叉反应试验表明该方法具有较高的特异性。利用建立的间接ELISA技术,对50份自然患病的近江牡蛎鳃组织进行类立克次体检测,阳性率为89%。

【Abstract】 The indirect enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was developed for the rapid detection of RLOs by polyclonal antiserum against a rickettsia-like organism from oyster Crassostrea ariakensis produced in the male BALB/c mouse and the horseradish peroxidase-conjugated goat anti-mouse IgG(HRP-IgG).The ELISA method was favored by high sensitivity,and lowest detection dose of 50 ng RLO protein.The crossreaction assay showed the ELISA method had the high specificity.In the detection of the diseased oyster gills,89 % of 50 samples were found to be positive by the indirect ELISA method.

【基金】 国家自然科学基金资助项目(39970581);广东省自然科学基金资助项目(06300897);中国博士后科学基金资助项目(20060390731)
  • 【分类号】S944.4
  • 【被引频次】6
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