CpG-ODN对大肠杆菌诱导的山羊实验性乳腺炎乳腺的保护作用研究

【摘要】 选择同处于泌乳初期的睢宁白山羊6头,体重为30~40 kg。产后第5 d早上挤奶后,于右乳区经过乳头管灌注10μg/kg CpG-ODN,左乳区则通过乳头管灌入等体积的灭菌0.01 mol/L pH值7.2磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)作为对照,灌注后第3 d按同等剂量进行二次灌注,二次灌注后第2 d早上挤奶后,于左右乳区经乳导管灌注2×109CFU/ml大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)各3 ml,分别于灌注细菌前(定义为0 h),灌注后8,16,24,48,72 h收集左右乳区乳汁,灌注大肠杆菌72 h后,处死动物,取乳腺组织。临床症状观察显示,乳腺内灌注3 ml 2×109CFU/ml的大肠杆菌能迅速诱导山羊典型的急性乳腺炎症状。组织学观察显示感染大肠杆菌后72 h乳腺腺泡内仍有少量嗜中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophils,PMN)浸润,但实验乳区已无浸润。乳汁大肠杆菌数在感染后16 h上升至最高。乳汁白细胞介素-6(Interleukine-6,IL-6)水平在感染后16 h上升至最高,CpG-ODN能显著提高感染前乳汁IL-6水平,而在感染后24 h实验乳区较对照下降了33.73%(P<0.05)。乳汁肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-,αTNF-α)水平在感染后16 h上升至最高,其中在感染后24 h实验乳区较对照下降35.29%(P<0.01)。乳汁N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl--βD-glucosaminidase,NAGase)水平在感染后16 h达最高(P<0.01),CpG-ODN能显著提高感染后8 h乳汁NAGase水平。提示CpG-ODN可通过提高乳汁IL-6水平,减少了乳汁中大肠杆菌数量,减轻了炎症介质对细胞的损伤,并能明显缩短炎症过程。证实了CpG-ODN对大肠杆菌感染诱发的山羊乳腺炎的乳腺有保护作用。更多还原