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氯化硝基四氮唑蓝显色检测超氧阴离子自由基的研究

Spectrophotometric Determination of Superoxide Anion Radical with Nitroblue Tetrazolium

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【作者】 刘瑞恒付时雨詹怀宇

【Author】 LIU Rui-heng,FU Shi-yu,ZHAN Huai-yu(State Key Laboratory of Pulp and Paper Engineering,South China University of Technology,Guangzhou 510640,China)

【机构】 华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室 广东广州510640广东广州510640

【摘要】 将超氧化钾(KO2)溶解于二甲基亚砜(DMSO)和十八冠醚混合溶剂中可以制备稳定的超氧阴离子自由基(O2-.)的溶液,在该溶液体系中O2-.与氯化硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)可以定量反应生成蓝色的单甲臢(monoformazan),用分光光度法进行检测。研究证实:单甲臢在DMSO溶液中的最大吸收波长为680 nm;反应时间和反应温度对测定结果有一定的影响。NBT与O2-.反应5 min较为适宜;由于低温条件下O2-.较为稳定,故测定温度维持在20℃左右。反应后体系吸光度与O2-.量之间的线性方程为:A680=(-0.071±0.015)+(2.607±0.037)X,r=0.999 8,其中X为O2-.的量,标准偏差为1.4%。抗坏血酸对O2-.清除效果的验证实验表明,该方法可应用于实验室抗氧化剂的筛选与研究。

【Abstract】 Highly stable superoxide anion radical(O-2·) solution prepared by dissolving KO2 in dimethyl sulfoxide(DMSO) and 18-crown-6 ether could react with nitroblue tetrazolium to form a blue compound with a maximum absorbance wavelength at 680 nm.Spectrophotometric results showed that the optimum time and temperature for the reaction of O-2· and NBT was 5 min and 20 ℃,respectively,and that the relationship between monoformazan absorbance and O-2· concentration was linear with a correlation coefficient of 0.999 8.The standard deviation was 1.4%.It was found that ascorbic acid could eliminate O-2· effectively,thus the proposed method can also be used for the screening of antioxidants in the laboratory.

【基金】 国家自然科学基金资助项目(20477046);国家高技术研究发展计划(863计划)重点项目(2007AA100704)
  • 【文献出处】 分析测试学报 ,Journal of Instrumental Analysis , 编辑部邮箱 ,2008年04期
  • 【分类号】O657.3
  • 【被引频次】46
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