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水稻叶片cDNA-AFLP选择性扩增反应体系的优化
Optimization of cDNA-AFLP selective ampliation reaction system in Oryza sativa leaves
【摘要】 在水稻Oryza sativa叶片响应稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis取食后的cDNA-AFLP试验中,对25μL体系中预扩增和选择性扩增的引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度及TaqDNA聚合酶用量4种反应条件影响因子进行不同梯度的优化研究。结果表明,PCR选择性扩增反应时,总反应液25μL体系中引物浓度为0.2μmol/L、dNTP浓度为0.2mmol/L、镁离子浓度为2.0mmol/L、TaqDNA聚合酶用量为13.336n kat/25μL时,可得到更多鲜明可辨的TDFs。
【Abstract】 The optimization of cDNA-AFLP selective ampliation reaction system in Oryza sativa L.leaves were studied.Different levels on concentration of primer,dNTP mixture,Mg2+ and Taq DNA polymerase were set in this experiment.The results showed that the TDFs bands were clear and more in the following conditions: the primer concentration was 0.2μmol/L;dNTP concentration was 0.2mmol/L;Mg2+ concentration was 2.0mmol/L;Taq DNA concentration was 13.336n kat/25μL .
【关键词】 水稻；
选择性扩增；
体系优化；
cDNA-AFLP；
【Key words】 Oryza sativa L.； selective ampliation； optimization system； cDNA-AFLP；
【Key words】 Oryza sativa L.； selective ampliation； optimization system； cDNA-AFLP；
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30571128);贵州省自然科学基金重大资助项目(2002F009)
- 【文献出处】 山地农业生物学报 ,Journal of Mountain Agriculture and Biology , 编辑部邮箱 ,2008年03期
- 【分类号】S511
- 【被引频次】14
- 【下载频次】214