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ISSR标记在扁玉螺中的初步应用

Preliminary application of ISSR technique in Neverita didyma

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【作者】 孙始威吴克

【Author】 Shiwei Sun1, Ke Wu2 (1. Life Science College, Ludong University, Yantai 264025, Shangdong, China; 2. Economic-Technological Development Area No. 8 Elementary School, Yantai 264006, Shangdong, China)

【机构】 鲁东大学生命科学学院烟台经济技术开发区第八小学 山东烟台264025山东烟台264006

【摘要】 以扁玉螺基因组DNA为材料,分析了Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物以及模板DNA浓度对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立了一套适合扁玉螺的ISSR-PCR反应体系。该反应体系包括:2.0mmol/L的Mg2+,0.25mmol/L的dNTP,0.8U的TaqDNA聚合酶,0.2μmol/L的ISSR引物和40ng模板DNA。利用优化后的反应体系,从30条ISSR引物中筛选出了13条扩增效果较好的引物,这为进一步利用ISSR标记研究扁玉螺的遗传多样性打下了基础。

【Abstract】 The influence of Mg2+, dNTP, Taq DNA polymerase, ISSR primer and template DNA concentration on the result of ISSR- PCR amplification was analyzed using the genomic DNA of Neverita didyma. The ISSR-PCR reaction system was established for Neverita didyma. The reaction system was as follows: 2.0 m mol/L Mg2+, 0.25 m mol/L dNTP, 0.8 U Taq DNA polymerase, 0.2 μ mol/ L ISSR primer, 40 ng template DNA. Using the optimized reaction system, 13 primers with good polymorphism screened from 30 ISSR primers were used to conduct ISSR analysis. The result provided basis for further the analysis of genetic diversity of Neverita didyma by ISSR marker.

【关键词】 扁玉螺ISSR-PCR引物筛选
【Key words】 Neverita didymaISSR-PCRprimer screening
  • 【文献出处】 生命科学仪器 ,Life Science Instruments , 编辑部邮箱 ,2008年04期
  • 【分类号】S917.4;Q78
  • 【被引频次】2
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