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山地杨MD—110原生质体的分离技术
 
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【作者】
蒋祥娥
;
蔡桁
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赵弘越
;
冈村政则
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【作者单位】
湖北省林木育种科学技术中心
;
湖北省武昌实验中学
;
湖北省林木育种科学技术中心 湖北武汉
;
湖北武汉
;
【文献出处】
湖南林业科技
,
Hunan Forestry Science & Technology
,
编辑部邮箱
2008年 01期
期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】
山地杨MD—110
;
原生质体
;
分离技术
;
酶解
;
纯化
;
培养
;
【摘要】
山地杨MD—110(P.maximowiczii×P.deltoides)是黑杨派与青杨派的优良杂交品种。选择生长约1个月无菌苗的健壮叶片(长1.5~2 cm),切成长约0.5 mm的细条,在2%纤维素酶RS、0.05%果胶酶Y—23、0.6 M甘露醇(pH=5.6)组成的酶液进行分离,分离出大量的具有活力的原生质体,且大小均匀,细胞膜完整;酶解2 h后轻轻摇动培养皿利于酶解,酶解时间以6 h为宜。纯化后其原生质体的产量为3.6×107/gfr.wt,活力可达90%以上。纯化后的原生质体在B5(2倍浓度)培养基,附加2,4—D 10 mg.L-1、NAA 0.2 mg.L-1和BAP 1 mg.L-1中进行高密度液体浅层培养。
【更新日期】
2008-04-10
【分类号】
S792.11
【正文快照】
原生质体培养是20世纪80年代的一个研究热点,日本和中国在这一领域做出了较大的贡献,日本科学家成功地进行了大约70个植物品种的原生质体培养[1],我国获得了30个以上品种的原生质体再生植株。林木原生质体培养起步较晚,到目前为止,有12个树种、杂种或无性系获得了原生质体的再?
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