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山地杨MD—110原生质体的分离技术  
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【作者】 蒋祥娥; 蔡桁; 赵弘越; 冈村政则;
【作者单位】 湖北省林木育种科学技术中心; 湖北省武昌实验中学; 湖北省林木育种科学技术中心 湖北武汉; 湖北武汉;
【文献出处】 湖南林业科技 , Hunan Forestry Science & Technology, 编辑部邮箱 2008年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 山地杨MD—110; 原生质体; 分离技术; 酶解; 纯化; 培养;
【摘要】 山地杨MD—110(P.maximowiczii×P.deltoides)是黑杨派与青杨派的优良杂交品种。选择生长约1个月无菌苗的健壮叶片(长1.5~2 cm),切成长约0.5 mm的细条,在2%纤维素酶RS、0.05%果胶酶Y—23、0.6 M甘露醇(pH=5.6)组成的酶液进行分离,分离出大量的具有活力的原生质体,且大小均匀,细胞膜完整;酶解2 h后轻轻摇动培养皿利于酶解,酶解时间以6 h为宜。纯化后其原生质体的产量为3.6×107/gfr.wt,活力可达90%以上。纯化后的原生质体在B5(2倍浓度)培养基,附加2,4—D 10 mg.L-1、NAA 0.2 mg.L-1和BAP 1 mg.L-1中进行高密度液体浅层培养。
【更新日期】 2008-04-10
【分类号】 S792.11
【正文快照】 原生质体培养是20世纪80年代的一个研究热点,日本和中国在这一领域做出了较大的贡献,日本科学家成功地进行了大约70个植物品种的原生质体培养[1],我国获得了30个以上品种的原生质体再生植株。林木原生质体培养起步较晚,到目前为止,有12个树种、杂种或无性系获得了原生质体的再?

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