【摘要】 目的:评估电穿孔法3个主要变量(DNA剂量、接种部位和电压)对诱导Balb/c小鼠体液免疫应答的影响。方法:用能够表达荧光蛋白的荧光素酶质粒肌肉注射小鼠,通过荧光蛋白表达量的测定观察电穿孔法对肌肉细胞中抗原基因的转染效率和蛋白表达的影响。构建乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)的DNA疫苗,电穿孔法接种疫苗,在DNA疫苗的剂量(0.5、5.0和50.0μg)、接种部位(肌肉、皮内和皮下)及电穿孔所施加电压(0、36和60V)改变时,采用ELISA法检测HBV表面抗体(HBsAb),以观察小鼠体液免疫的变化。结果:电穿孔能够加速抗原基因在小鼠体内的表达,荧光蛋白表达随电击电压的升高而增强(P<0.01);5μg荧光素酶质粒电穿孔所施加电压60V时荧光蛋白表达在7d时达到最高。注射途径为皮内的电转染效果最佳。在电场作用下,电压36和60V时HBVDNA疫苗5.0μg肌肉注射后产生抗体水平分别为22.4和81.2IU.mL-1。结论:电穿孔法可以有效提高HBVDNA疫苗的免疫原性。更多还原