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基于纳米金固定大肠杆菌O157:H7酶免疫传感器的研究

Enzyme immunosensor for E.coli O157:H7 based on nano Au associated immobilization

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【作者】 马静张伟尉李闻陈晓春刘红艳黄正

【Author】 Ma Jing1,2,Zhang Wei-wei1,Li Wen1,Chen Xiao-chun1,Liu Hong-yan1,Huang Zheng1*(1.MOE Key Lab of Environment and Health,School of Public Health,Tongji Medical College,Huazhong University of Science & Technology,Wuhan 430030,China;2.Yichang Centre for Disease Control and Prevention,Yichang 443000,China)

【机构】 华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室 武汉430030湖北省宜昌市疾病预防控制中心湖北宜昌443000武汉430030

【摘要】 目的:建立一种快速检测大肠杆菌O157:H7的新型酶免疫传感器。方法:用静电吸附作用和抗原抗体特异性反应将大肠杆菌O157:H7单克隆鼠抗固定在辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG/纳米金修饰的玻碳电极表面,制备用于检测大肠杆菌O157:H7的酶免疫传感器。通过循环伏安法和恒电位法测定大肠杆菌O157:H7被固定在电极表面引起的电信号改变进行定量分析。结果:在含0.1 mol/L PBS(pH7.4),1 mmol/L二甲氨基甲基二茂铁,0.2 mmol/L H2O2,30℃的底液中该酶免疫传感器的检出限为1×102cfu/ml,检测线性范围为1×103~1×105cfu/ml,相关系数为r=0.997。结论:该传感器制备方法简单,具有灵敏度高、检测时间短、操作简单等优点,在临床医学和环境监测中具有较好的应用价值。

【Abstract】 Objective:To develop a rapid and sensitive enzyme immunosensor for detection of Escherichia Coli O157:H7.Methods:The enzyme immunosensor was fabricated by immobilizing monoclonal mouse IgG for E.coli O157:H7 on the surface of goat anti-mouse IgG-HRP and nano Au modified glassy carbon electrode through electrostatic adsorption and antigen-antibody specific reaction.The change of electrical signal caused by the capture of E.coli on the electrode surface was detected by Cyclic Voltammetry and Controlled Potential Electrolysis.Results:The linear response of the enzyme immunosensor was in the range of 1×103~1×105 cfu/ml with the correlation coefficient of 0.997 and detection limit of 1×102 cfu/ml in the solution of 0.1 mol/L PBS(pH 7.4),1 mmol/L dimethylamino-methyl-ferrocene,0.2 mmol/L H2O2 and under 30℃.Conclusion:The method is sample,rapid,sensitive and suitable for the application in the clinical and environmental monitoring.

  • 【文献出处】 中国卫生检验杂志 ,Chinese Journal of Health Laboratory Technology , 编辑部邮箱 ,2007年12期
  • 【分类号】R378.21
  • 【被引频次】24
  • 【下载频次】318
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