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白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段的克隆及其作为基因表达内参照的应用  
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【英文篇名】 Cloning and sequences of Aedes albopictus β-actin gene fragment and its application as an internal control
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 焦健华; 马磊; 张东辉;
【英文作者】 JIAO Jian-hua1; 2; MA Lei2; ZHANG Dong-hui2(1.Department of Gastroenterology; the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University; Nanjing 210029; China; 2.Department of Pathogen Biology; Nanjing Medical University; Jiangsu Province Key Laboratory of Modern Pathogen Biology);
【作者单位】 南京医科大学第一附属医院消化科; 南京医科大学病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室; 南京医科大学病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室 江苏南京; 南京医科大学病原生物学系; 江苏省现代病原生物学重点实验室; 江苏南京;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2007年 06期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 白纹伊蚊; C6/36细胞; β-肌动蛋白基因; PCR; RT-PCR;
【英文关键词】 Aedes albopictus; C6/36 cells; β-actin gene; PCR; RT-PCR;
【摘要】 目的获取白纹伊蚊β-肌动蛋白基因序列并探讨其作为基因表达内参照的作用。方法根据昆虫β-肌动蛋白核苷酸序列的高度保守区设计引物,通过PCR的方法从白纹伊蚊C6/36细胞中扩增获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,进一步通过RT-PCR的方法验证其在稳定转染空载体和40S核糖体蛋白S4(RPS4)基因的白纹伊蚊C6/36细胞中的表达。结果获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,长911 bp,与其他几种蚊β-肌动蛋白基因对应序列的相似性在89%以上。在稳定转染空载体和RPS4基因的C6/36细胞中,均可稳定地扩增出目的基因。结论成功获得了白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,并且该片段完全可以用作基因表达差异分析时的内参照基因。
【英文摘要】 Objective Objective To isolate and sequence Aedes albopictus β-actin gene and test its applicability as an internal control in gene expression studies.Methods Primers were designed based on the conserved nucleotide sequences of insect β-actin genes.A fragment of Ae.albopictus β-actin gene was amplified from the cDNA of C6/36 cells.The expression levels of Ae.albopictus β-actin in RPS4 gene stably transfected and control vector transfected C6/36 cells were both detected by RT-PCR. Results A fragment of 911 b...
【基金】 南京医科大学科技发展基金重点项目(No.06NMUZ005)
【更新日期】 2008-02-29
【分类号】 R384.1
【正文快照】 肌动蛋白(actin)是真核生物中普遍存在,在进化中高度保守的蛋白质家族。它几乎参与了真核细胞的所有生理过程,如细胞分裂、染色体运动、细胞器运动、细胞激化、胞质流动等[1~3]。肌动蛋白有6种不同的异构体,根据不同的等电点,分别称之为α、β、γ-肌动蛋白。β-肌动蛋白作为一

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