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播娘蒿DsCOR基因的原核表达、蛋白纯化、及性质研究

A study on the protein expressed,purification,and character of DsCOR Gene from Descurania sophia(L.) Webb

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【Author】 LIU Yu-kun1,WANG Hong1,YANG Ge1,WANG Le1,YOU Fangfang1,SU Yan-qiu1,GUO Hong2,CAO Yi1,QIAO Dai-rong1(1.Sichuan Public Experiment Platform of Bioinformatics and Metabolic Engineering,College of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610064,China;2.Sichuan Rural Science and Technology Development Center,Chengdu,Sichuan,610101,China)

【机构】四川大学生命科学学院四川省生物信息与代谢工程共享实验平台；四川省农村科技发展中心；四川大学生命科学学院四川省生物信息与代谢工程共享实验平台成都610064；成都610064；成都610101；

【摘要】利用PCR方法扩增DsCOR基因的蛋白编码序列,经BamHⅠ、SacⅠ酶切后连接入pET32a原核表达载体,构建的pET32a-DsCOR融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21进行原核表达.建立了"煮沸-镍离子亲和层析"的蛋白纯化方法.对纯化的DsCOR蛋白进行高温耐受性、pH耐受范围、紫外耐受性方面的研究.更多还原

【Abstract】 The ORF of DsCOR was amplified by PCR,and cloned into expression vector pET32a to construct recombinant expression plasmid pET32a-DsCOR.The recombinant plasmid was transformed into E.coli BL21 and induced to express recombinant protein with IPTG.According to hydrophilic character,The fusion protein was further purified through boiling and affinity chromatography;concentrated by PEG;analyzed by SDS-PAGE.Research about protein resistance to heat,acid,alkali and UV was done.更多还原

【关键词】播娘蒿； COR基因；原核表达；蛋白纯化；蛋白性质；
【Key words】 Descurainia sophia(L.) Webb； COR(cold regulated gene)； low temperature stress； prokaryotic expression； protein purification； protein character；

【基金】国家自然科学基金(30771312);四川省应用基础项目(2006J13-107);四川省青年基金(05ZQ026-029)

【文献出处】四川大学学报(自然科学版) ,Journal of Sichuan University(Natural Science Edition) , 编辑部邮箱 ,2007年06期

【分类号】Q943
【被引频次】3
【下载频次】280

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