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鼠肝质膜蛋白质组研究的方法评估
【摘要】 细胞质膜是细胞中重要的细胞器,在肝功能的发挥中具有非常重要的作用.使用蔗糖密度梯度离心纯化细胞质膜,通过电子显微镜观察和免疫印迹法检验膜的纯度.结果显示,与组织匀浆成分相比,质膜富集了20倍,线粒体的污染减少了约50%.提取的蛋白质用二/一维凝胶电泳(2DE/1DE)分离、胰酶酶解、电喷雾四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定,或者提取的蛋白质直接进行溶液内酶解、液相色谱串联电喷雾离子阱质谱(LC-LTQ)(鸟枪法)鉴定.一共鉴定了547个非冗余蛋白质,其中34%为质膜或质膜相关蛋白质.优化和评估了质膜蛋白质组研究的方法,且对鼠肝质膜蛋白质组进行了系统的分析.
【基金】 中国人类肝脏蛋白质组计划(CNHLPP,批准号:2004BA711A18);湖南省教育厅及湖南省科技厅研究课题(批准号:05FJ2002,05FJ4018)资助
- 【文献出处】 中国科学(C辑:生命科学) ,Science in China(Series C:Life Sciences) , 编辑部邮箱 ,2007年06期
- 【分类号】Q51
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