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耐高温酸性α-淀粉酶基因部分序列的克隆与分析

Cloning and sequence analysis of partial thermostable acid α-amylase gene

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【作者】 王淑军邓祥元李富超秦松陆兆新

【Author】 WANG Shu-jun1,3,DENG Xiang-yuan2,LI Fu-chao2,QIN Song2, Lu Zhao-xin1(1.College of Food Science and Technology,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;2.Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China;3.Huaihai Institute of Technology,Jiangsu Key Laboratory of Marine Biotechnology,Lianyungang 222005,China)

【机构】 南京农业大学食品科技学院中国科学院海洋研究所南京农业大学食品科技学院 江苏南京210095淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室江苏连云港222005山东青岛266071江苏南京210095

【摘要】 利用已报道的α-淀粉酶基因序列的保守区域设计引物,通过聚合酶链式反应(PCR)获得了高温球菌Thermococcus sp. HJ21的耐高温酸性α-淀粉酶基因的部分序列。通过对该序列的同源性比较分析发现,高温球菌Thermococcus sp. HJ21与热水高温球菌Thermococcus hydrothermalis和Thermococcus sp. OGL-20P的亲缘关系最近,序列相似度达到95%以上;利用Swiss Model预测该基因产物的3级结构,显示其具有典型的(β/α)8桶状结构;通过分析密码子的使用情况得知,该α-淀粉酶存在着密码子的兼并性和使用的偏向性问题。

【Abstract】 A fragment of α-amylase gene(1164bp) was cloned,sequenced and analyzed from a hyperthermophilic archae Thermococcus sp.HJ21 by PCR method,where the primers were designed via analysis of the known α-amylase on the website.The results of phylogenetic analysis showed that the similarities of α-amylase gene with homologous gene in Thermococcus hydrothermalis and Thermococcus sp.OGL-20P were over 95%.There were problems of degenerate and preference of codon usage in α-amylase through analysing the sequence of amimo acid.And the deduced protein three-tier structure of α-amylase with Swiss Model displayed that there was a typical(β/α)8 structure on the protein three-tier structure.

【基金】 中国科学院知识创新工程重要方向项目(KZCX3-SW-223,KZCX2-YW-209);江苏省“六大人才高峰”第三批资助项目(06-A-017);江苏省教育厅自然科学基金项目(06KJB550004)
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】7
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