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猪弓形虫病特异PCR诊断方法的建立

Development of PCR assay for diagnosing swine toxoplasmosis

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【作者】 谢德华朱兴全崔焕粦丘初集范万红廖申权翟敏莉林瑞庆翁亚彪

【Author】 XIE De-hua~1, ZHU Xing-quan~1, CUI Huan-lin~2, QIU Chu-ji~2, FAN Wan-hong~(3), LIAO Shen-quan~1, ZHAI Min-li~1, LIN Rui-qing~1, WENG Ya-biao~1(1. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642,China; 2. Guangzhou Guangsanbao Animal Husbandry Ltd., Zengcheng 511365,China; 3. Center of Inspection and Quarantine Techniques for Animals and Plants, Shenzhen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shenzhen 518045,China)

【机构】 华南农业大学兽医学院广州市广三保畜牧有限公司深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心华南农业大学兽医学院 广东广州510642广东广州510642广东增城511365广东深圳518045广东广州510642

【摘要】 以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记,建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法。应用人工感染的方法建立了猪弓形虫病动物模型,摸索出猪弓形虫病PCR检测的最佳条件。敏感性和特异性试验结果显示,该PCR方法最低能检测到10 个弓形虫速殖子的DNA,且与相关的8种原虫和线虫均无交叉反应,证明该PCR方法具有高度的敏感性和特异性。动物感染试验结果证明,在试验猪出现明显临床症状时(感染后第5 d),对取材的8 个组织样品用该PCR方法检测,有6个组织样品为阳性,其中检出率最高的组织为肺门淋巴结。

【Abstract】 The first internal transcribed spacer (ITS1) of nuclear ribosomal DNA was amplified from the genomic DNA of Toxoplasma gondii by PCR using the species-specific primers. The assay was highly sensitive and was able to detect 10 tachyzoites of T. gondii. On day 5 post-infection, the specific PCR products of T. gondii could be amplified from six of the eight examined tissues of pig after experimental infection, and the bronchopulmonary lymph node could be selected as tissue for the PCR assay.

【关键词】 弓形虫特异PCR诊断
【Key words】 Toxoplasma gondiispecific PCRswinediagnosing
【基金】 国家杰出青年科学基金项目(30225033);广东省科技计划项目(2004B20201008)
  • 【文献出处】 中国兽医科技 ,Chinese Journal of Veterinary Science and Technology , 编辑部邮箱 ,2005年04期
  • 【分类号】S854.4
  • 【被引频次】42
  • 【下载频次】646
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