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抗癫痫肽重组腺伴病毒载体的构建及鉴定

Construction and identification of recombinant adeno-associated virus transducing antiepilepsy peptide gene

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【Author】 WANG Zong-ren1, SHAO Zhong-jun2, LI Jing-hua1, HANG Li1, MA Jing1, LONG Yin1, ZHANG Lei2, ZHAO Yan-ling1 (1.Department of Traditional Chinese Medicine, Xijing Hospital, the Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China; 2. Department of Epidemiology, the Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China; 3. Department of Epidemiology, School of Public Health, Fudan University, Shanghai 200023, China)

【机构】第四军医大学附属西京医院中医科；第四军医大学流行病学教研室；第四军医大学附属西京医院中医科陕西西安710032；陕西西安710032；复旦大学公共卫生学院流行病教研室；上海200023；

【摘要】目的为了研究蝎毒癫痫肽对癫痫模型的治疗作用,构建并产生重组腺伴病毒(AAV)载体。方法将AEP外源性核酸片段插入AAV-shufer质粒pSSHG-Neo的KpnI-BamH I位点构建AAV。用腺病毒辅助质粒pFG140、包装质粒pAAV/Ad及构建的pSSHG-AEP三质粒磷酸钙共沉淀法在肾胚胎293细胞系中同源重组包装rAAV。使用地高辛标记的斑点杂交方法测定重组病毒滴度。结果成功构建了重组病毒质粒pSSHG/AEP,经蔗糖梯度离心法获得rAAV组分,梯度稀释测得滴度为1.46×1012PFU/mL。结论成功地制备了AEP重组腺伴随病毒(rAAV/AEP)载体,为癫痫基因治疗实验奠定了基础。更多还原

【关键词】抗癫痫肽；腺伴病毒载体；构建；
【Key words】 antiepilepsy peptide； adeno-associated virus (AAV)； construction；

【基金】国家自然科学基金资助项目(30671764)

【文献出处】中草药 ,Chinese Traditional and Herbal Drugs , 编辑部邮箱 ,2005年12期

【分类号】R346
【被引频次】7
【下载频次】83

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