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重组pET30a/hsBLyS质粒在BL21(DE3)菌株中的稳定性观察

Study on the heredity stability of a recombinant plasmid pET30a/hsBLyS in E.coli BL21(DE3)

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【作者】 吴玉荣吴海涛曹萌曹鹏张双全

【Author】 WU Yu-rong,WU Hai-tao,CAO Meng,CAO Peng,ZHANG Shuang-quan(Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, Nanjing Normal University, Nanjng 210097, China)

【机构】 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室 江苏南京210097江苏南京210097江苏南京210097

【摘要】 将构建的含有pET30a/hsBLyS重组质粒的BL21 (DE3)菌种,在含硫酸卡那霉素的平板培养基划线连续传代至 100代 100代次菌种经显微观察,为典型的革兰氏阴性大肠杆菌,生化特性没有改变 提取0、50、100代质粒DNA限制性内切酶切割检查,酶切图谱没有改变,DNA测序未见hsBLyS基因变异 传代前后菌种诱导表达hsBLyS,表达水平和hsBLyS生物学和免疫学活性均无明显差异

【Abstract】 The strain of pET30a/hsBLyS/BL21 (DE3)had been subcultured consecutively from the original stock to the 100th generation on LB plates with kanamycin.The digestion products of plasmid in the original ,the 50th and the 100th generation by NdeⅠand BamHⅠrestriction enzymes are same.As well,DNA sequences of the hsBLyS gene shows no differences among the generations.In addition to that,the original strain and the 100th generation strain have a similar hsBLyS expression level and these hsBLyS proteins show similar activites.

【关键词】 BLyS工程菌种传代遗传稳定性
【Key words】 hsBLySengineering straingenerationsheredity stability
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30270193)
  • 【文献出处】 信阳师范学院学报(自然科学版) ,Journal of Xinyang Teachers College(Natural Science Edition) , 编辑部邮箱 ,2005年02期
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】369
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