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应用RT-nested PCR检测猪传染性胃肠炎病毒

Study on detecting transmissible gastroenteritis virus by reverse transcription-nested polymerase chain reaction

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【作者】 王玉洁刘金龙彭树英杨瑞锋张涌

【Author】 WANG Yu-jie,LIU Jin-long,PENG Shu-ying,YANG Rui-feng,ZHANG Yong(Institue of Bio-Engineering,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)

【机构】 西北农林科技大学生物工程研究所西北农林科技大学生物工程研究所 陕西杨凌712100陕西杨凌712100陕西杨凌712100

【摘要】 根据GenBank中已发表的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)基因序列,利用Primer5.0程序软件,设计并合成了M基因的2对引物,以mRNA为模板,通过RT-PCR,RT-nestedPCR方法,成功扩增出长度为1328bp和1037bp的TGEV目的片段,但未扩增出猪传染性腹泻病毒(PEDV)片段。在优化RT-PCR反应条件的基础上,建立了快速检测TGEV的诊断方法。结果表明,RT-nestedPCR方法可用于检测猪传染性胃肠炎病毒,而且此方法简单省时、灵敏性高,可以作为检测RNA病毒的一种分子生物学方法。

【Abstract】 Two pairs of oligonucleotide primers appropriate for PCR amplication were selected based on the gene encoding of the M protein of TGEV.The amplified products of TGEV were 1 328 bp,1 037 bp respectively,but as to PEDV nothing was amplified.By a reverse transcription-nested polymerase chain reaction (RT-nested PCR) assay,a quick detection of TGEV after optimization of the reaction conditions was developed.The results showed that RT-PCR assay can be used to detect the virus of RNA.

【关键词】 猪传染性胃肠炎病毒RT-PCRRT-nestedPCRM基因
【Key words】 TGEVPT-PCRPT-nested PCRM gene
【基金】 国家"863"高技术资助项目(2001AA213081)
  • 【文献出处】 西北农林科技大学学报(自然科学版) ,Journal of Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry , 编辑部邮箱 ,2005年02期
  • 【分类号】S854.4
  • 【被引频次】15
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