疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究-中国学术期刊网络出版总库

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疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究

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【英文篇名】	Purification and properties of a thermostable chitinase from thermophilic fungus Thermomyces lanuginosus
【下载频次】	★★★★★
【作者】	郭润芳; 李多川; 王荣;
【英文作者】	GUO Run-fang LI Duo-chuan* WANG Rong (Department of Environmental Biology; Shandong Agricultural University; Tai′an 271018; China);
【作者单位】	山东农业大学环境生物系; 山东农业大学环境生物系泰安;
【文献出处】	微生物学报 , Acta Microbiologica Sinica, 编辑部邮箱 2005年 02期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊中国期刊方阵 CJFD收录刊
【中文关键词】	嗜热真菌; Thermomyces lanuginosus; 几丁质酶; 纯化; 性质;
【英文关键词】	Thermophilic fungus; Thermomyces lanuginosus; Chitinase; Purification; Properties;
【摘要】	采用硫酸铵沉淀、DEAE SepharoseFastFlow阴离子层析、Phenyl Sepharose疏水层析等步骤获得了凝胶电泳均一的疏绵状嗜热丝孢菌 (Thermomyceslanuginosus)几丁质酶。经SDS PAGE和凝胶过滤层析测得纯酶蛋白的分子量在 4 8～ 4 9 .8kD之间。该酶反应的最适温度和最适pH分别为 5 5℃和 4 5 ,在pH4 5条件下 ,该酶在 5 0℃以下稳定 ;6 5℃的半衰期为 2 5min ;70℃保温 2 0min后 ,仍保留 2 4 %的酶活性。其N 端氨基酸序列为AQGYLSVQYFVNWAI。金属离子对几丁质酶的活性影响较大 ,Ca2 + 、Na+ 、K+ 、Ba2 + 对酶有激活作用 ;Ag+ 、Fe2 + 、Cu2 + 、Hg2 + 对酶有显著的抑制作用 ;以胶体几丁质为底物的Km 和Vmax值分别为 9 .5 6mg mL和 2 2 . 12 μmol min。抗菌活性显示 ,该酶对供试病原菌有不同程度的抑制作用。
【英文摘要】	A thermostable extracellular chitinase from culture supernatant of a thermophilic fungus Thermomyces lanuginosus was purified to SDS-PAGE homogeneity, by using ammonium sulfate fraction, DEAE-Sepharose Fast flow chromatography, Pheny1-Sepharose Fast Flow chromatography. A molecular mass of the purified enzyme was between 48～49.8kD determined by SDS-PAGE and gel filtration chromatography. The chitinase exhibited optimum catalytic activity at pH 4.5 and 55℃ respectively. It was thermostable at 50℃ and retain...
【基金】	国家自然科学基金 (3 0 2 70 0 13 ,3 0 170 0 13 ); 国家“863计划”(2 0 0 3AA2 41162 )~~
【更新日期】	2005-08-19
【分类号】	Q946
【正文快照】	几丁质酶 (EC3 2 1 14 )催化几丁质水解产生N 乙酰氨基葡萄糖单体或低分子量的几丁寡糖 ,该酶广泛分布于生物体内 ,包括细菌、真菌、高等植物、昆虫和一些脊椎动物中[1] 。许多病原真菌和昆虫以几丁质作为细胞壁或外骨骼的基本结构成分 ,因此几丁质酶被广泛应用于植物病虫害的

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