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溶栓新药瑞替普酶包涵体纯化和变性条件的研究

Studies on inclusion body purification and denaturation of Reteplase

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【作者】 王艳艳王革乔刚王君艳刘建峰陈冠军

【Author】 WANG Yan-yan1, WANG Ge 1,2, QIAO Gang2, WANG Jun-yan2, LIU Jian-feng2 & CHEN Guan-jun 1* (1. The State Key Laboratory of Microbiology, Shandong Univ., Jinan 250100, Shandong, China; 2. Shandong Yuanlong Biotechnology Inc., Jinan 250100, Shandong, China)

【机构】 山东大学微生物技术国家重点实验室山东元隆生物技术有限公司山东大学微生物技术国家重点实验室 山东济南250100山东济南250100山东元隆生物技术有限公司山东济南250100山东济南250100

【摘要】 在溶栓新药瑞替普酶制备的过程中,包涵体的纯化和溶解变性是关键步骤之一.本文探索了包涵体连续三次洗涤纯化方法,得到了较好的纯化效果.比较了两种不同的还原剂(β巯基乙醇和DTT)对包涵体溶解变性的影响,电泳和复性液活性测定结果表明β巯基乙醇是较理想的还原剂.

【Abstract】 The purification and resolution-denaturation of inclusion bodies is a key step in the preparation of recombinant thrombolytic regent Reteplase. Efficient purification is reached by the studied methods. Furthermore, two different reductants, β-mercaptoethanol and DTT, are adapted to resolve and denature inclusion bodies. The results of SAS-PAGE analysis and thrombolytic activity assay of the following refolded Reteplase proteins show that β-mercaptoethanol is more efficient for denaturation than DTT, which indicates that β-mercaptoethanol is an ideal reductant.

【基金】 济南市科技成果转化资助项目(产学研项目043024)
  • 【文献出处】 山东大学学报(理学版) ,Journal of Shandong University(Natural Science) , 编辑部邮箱 ,2005年04期
  • 【分类号】R94
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】354
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