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酵素-Ⅱ分离人神经干细胞球

Effects of dispaseⅡ on isolating neurospheres

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【作者】 孙剑瑞; 杨波; 杜英; 宋来君; 李国喜; 张清勇; 胡祥; 胡平生; 徐虹; 王云龙;

【Author】 SUN Jianrui 1),YANG Bo 2),DU Ying 3),SONG Laijun 2),LI Guoxi 1),ZHANG Qingyong 4),HU Xiang 5), HU Pingsheng 6), XU Hong 7), WANG Yunlong 8) 1)Graduate of Department of Neurosurgery,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052 2)Department of Neurosurgery,the First Affiliated Hospital,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052 3)Department of Microbiology and Immunology,College of Basic Medical Sciences,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052 4)Department of Thoracic Surgery,the Second Affiliated Hospital,Zhengzhou University,Zhengzhou 450014 5)Shengang Base of Produce,Study and Research,Shenzhen 518000 6)Biovitron Company,Sweden 999027 7)Henan Institute of Tumor Therapy and Prevention,Henan Province Tumor Hospital,Zhengzhou 450003 8)Henan Institute of Biomedicine Engineering,Zhengzhou 450003

【机构】 郑州大学; 郑州大学第一附属医院神经外科; 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室; 郑州大学第二附属医院胸外科; 深圳深港产学研基地; 瑞典Biovitron公司; 河南省肿瘤医院肿瘤研究所; 河南省生物工程研究所 神经外科学硕士研究生郑州450052; 郑州450052; 神经外科学硕士研究生郑州450052; 郑州450014; 深圳518000; 瑞典9990277; 郑州450003; 郑州450003;

【摘要】 目的:寻找一种有效分离神经干细胞球并获得大量单个神经干细胞的方法。方法:取20周胎龄人胚胎脑组织分离单细胞,应用DMEM/F12培养基培养形成神经干细胞球,取神经干细胞球,分别以2.50g/L、1.25g/L胰蛋白酶及0.6u/ml、1.2u/ml、1.8u/ml、2.4u/ml酵素-Ⅱ(DispaseⅡ)消化,观察消化过程及细胞形态,对消化后的单个细胞进行培养,观察细胞生长情况,并进行免疫细胞化学染色鉴定。结果:各浓度Dispase-Ⅱ均能较完全地消化神经干细胞球,其中1.2u/ml、1.8u/mlDispase-Ⅱ消化后的细胞生长状况最佳。胰蛋白酶消化后细胞有较大的损伤,成活细胞少。消化后的细胞Nestin抗体染色结果(+),证实为神经干细胞。结论:一定浓度的DispaseⅡ消化神经干细胞球后,可获得大量成活单个神经干细胞。

【Abstract】 Aim: To investigate an effective method to isolate neurospheres. Methods: Neurospheres were isolated with different dose of trypsinase and dispaseⅡ. The process and the shape of cells were observed.Immunocytochemistry was used for identification. Results: DispaseⅡ could isolate neuropheres into single cells, especially in concentration of 1.2 u/ml and 1.8 u/ml.Cells were damaged after isolated by using trypsinase and few viable cells were obtained. Conclusion: It is an ideal method to isolate neurospheres by using a certain concentration of dispaseⅡ.

【关键词】 神经干细胞; 酵素-Ⅱ; 人;
【Key words】 neural stem cell; dispaseⅡ; human;
【基金】 河南省医学科技创新人才工程项目
  • 【文献出处】 郑州大学学报(医学版) ,Journal of Zhengzhou University(Science Medical) , 编辑部邮箱 ,2005年03期
  • 【分类号】R329.2
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】113
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