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pQE30-bgln原核表达质粒的构建和鉴定  
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【英文篇名】 Construction and Identification of the Recombinant Prokaryotic Expression Plasmid pQE30-bgln
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【作者】 潘海芳; 王冰梅; 叶冰莹; 黄骐; 陈如凯; 陈由强;
【英文作者】 PAN Hai-fang~1; WANG Bing-mei~1; YE Bing-ying~1; HUANG Qi~2; CHEN Ru-kai~3; CHEN You-qiang~(1; 3)(1.Bioengineering College; Fujian Normal University; Fuzhou 350007; China; 2.Fuzhou Agriculture Instiute; Fuzhou 350018; 3.Key Lab of Eoo-physiology & Genetics Improvement for Sugarcane Ministry of Agriculture; Fuzhou 350002; China);
【作者单位】 福建师范大学生物工程学院; 福州市农业科学研究所; 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室; 福建师范大学生物工程学院 福建福州; 福建福州;
【文献出处】 福建师范大学学报(自然科学版) , Journal of Fujian Normal University(Natural Science), 编辑部邮箱 2005年 04期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 β-葡糖苷酶; pQE30; 构建; 原核表达; 白藜芦醇;
【英文关键词】 β-glucosidase; pQE30; construct; prokaryotic expression system; resveratrol;
【摘要】 构建重组原核表达质粒pQE30-bgln使之可以在大肠杆菌中表达以获得β-葡糖苷酶,用于提高从植物中提取白藜芦醇的得率.以克隆质粒pUCP67为模板,用降落PCR的方法扩增β-葡糖苷酶基因片段(bgln).利用原核表达载体pQE30构建pQE30-bgln重组质粒,用酶切电泳验证重组结果的正确性,测序检测质粒重组后序列情况.PCR结果显示扩增片段2.2 kb,与预期相同.重组质粒酶切后显示其大小约5.6kb,大小及酶切图谱与预期相同.经测序发现插入片段读码框正确.可用于原核表达的pQE30-bgln质粒构建成功.
【英文摘要】 A recombinant plasmid pQE30-bgln was constructed for obtaining the BGLN protein expressed in E.coil so as to develop the efficiency of extracting resveratrol from plants.Touch-down PCR was used to amplify the bgln gene from plasmid pUCP67 in which bgln was cloned.A new plasmid pQE30-bgln,was then constructed by inserting the amplified bgln gene into pQE30,a prokaryotic expression vector.Restriction analysis and sequencing were used to confirm the structure of pQE30-bgln.Results showed that a DNA fragment in...
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30371177); 福建省自然科学基金资助项目(B0310004); 福建省科技厅基金资助项目(K04030); 福建省教育厅基金资助项目(JB04232); 福建省教育厅基金资助项目(JA03171)
【更新日期】 2005-12-24
【分类号】 Q782
【正文快照】 β-葡糖苷酶(-βglucosidase,EC 3·2·1·21,以下简称BGLN)属于纤维素酶类,是一种能催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖的酶[1].近20年来,对β-葡糖苷酶基因的克隆和序列分析[2-3]及在毕赤酵母[4]、酿酒酵母[5]和大肠杆菌[6]中的表达都有见报道.作者构建所

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