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玉米大斑病菌RAPD分析最佳反应体系的建立
Establishment of the optimal RAPD reaction system of Setosphaeria turcica
【摘要】 通过对玉米大斑病菌RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立了一套适合玉米大斑病菌的扩增反应体系及反应程序:25μL体系中,加入Taq DNA聚合酶2 0 U、25 mmol L的MgCl2 2 0 mmol L、dNTP 200μmol L、随机引物30 ng、10×PCR buffer 1μL、DNA模板30 ng、用重蒸水补足25μL。反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性1 min, 37℃退火1 min,72℃延伸2 min,40循环; 72℃延伸6 min。
【Abstract】 The optimal RAPD reaction system of Setosphaeria turcica was established through experimentaion. In the total volume of 25 μL, there were 2 U Taq DNA polymerase, 2 mmol/L Mg2+, 200 μmol/L dNTP, 30 ng arbitrary primer, 1 μL 10×PCR buffer and 30 ng template DNA. Amplification was performed by the following program: 3 min at 94℃,40 cycles of 1min at 94℃, (1 min) at 37℃, 2 min at 72℃ and a final extention of 6 min at 72℃.
【关键词】 玉米大斑病菌;
RAPD分析;
最佳反应体系;
【Key words】 Setosphaeria turcica; RAPD analysis; optimal reaction system;
【Key words】 Setosphaeria turcica; RAPD analysis; optimal reaction system;
【基金】 国家自然科学基金项目(39970477);河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心项目资助
- 【文献出处】 河北农业大学学报 ,Journal of Agricultural University of Hebei , 编辑部邮箱 ,2005年01期
- 【分类号】S435.13
- 【被引频次】18
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