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盐酸克伦特罗单抗快速检测试剂盒的研制

Development of Monoclonal Antibody Enzyme Immunoassay for β-Adrenergic Agonist Clenbuterol Hydrochloride

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【作者】 王选年杨艳艳邢广旭李青梅杨继飞柴书军赵东康晓笛潘耀谦张改平

【Author】 WANG Xuan-nian~1,YANG Yan-yan~2,XING Guang-xu~2,LI Qing-mei~2,YANG Ji-fei~2,CHAI Shu-jun~2, ZHAO Dong~2,KANG Xiao-di~3,PAN Yao-qian~4,ZHANG Gai-ping~(2*)(1.Henan Vocational Technical Teachers College,Xinxiang,Henan 453003,China;2.Agricultural Academy of Henan Province, Zhengzhou 450002,China;3.Henan Baiao Biotechnology Co Ltd,Zhengzhou 450002,China;4.Faculty of Military Veterinary,Quartermaster University of PLA,Changchun 130062,China)

【机构】 河南职业技术师范学院动物科学系河南省农业科学院生物技术研究所河南百奥生物工程有限公司解放军军需大学军事兽医系河南省农业科学院生物技术研究所 河南新乡453003河南郑州450002吉林长春130062河南郑州450002

【摘要】 以竞争性酶免疫分析原理为基础 ,应用特异性克伦特罗 (Clenbuterol,CL )单克隆抗体研制成功了β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的快速检测 EL ISA试剂盒 (CL- Kit)。 CL- Kit线性检测范围为 0 .5~ 12 8μg/ L,各标准品的吸光值变异系数为 2 .3%~ 3.6 %。标准曲线呈典型的 S型 ,相关系数 R2 =0 .996 ,符合 4参数 L ogit曲线拟合。检测结果表明 :CL 单抗对 CL 的半数抑制量 IC50 为 7.94 μg/ L,对沙丁胺醇 (Sb)的 IC50 为 10 0 0 μg/ L,肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的 IC50 均≥ 6 4 0 0 μg/ L;CL- Kit与 Sb的交叉反应性为 0 .79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 .12 % ,与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。试剂盒测定回收率在 91%~ 10 5 % ,批内变异系数小于 2 0 % ,批间变异系数小于 10 %。试剂盒在保存期内稳定

【Abstract】 A competitive enzyme immunoassay with monoclonal antibody was established for measuring β-adrenergic agonist clenbuterol hydrochloride in urine and feed.The CL-Kit showed good sensitivity with the IC50 of 7.94 μg/L toward CL,(1 000) μg/L toward salbuterol and more than (6 400) μg/L towards norepinephrine,epinephine,isoprenaline and ractopamine.CL-Kit was performed with standard CL competitor,which produced sigmoidal like curves fitted to the four parameter logistic equation with the linear detection of 0.5-128 μg/L(R2=0.996) and the variation coefficient of 2.3%-3.6%.The CL-Kit generally had 0.79% cross-reactivity towards salbuterol,and showed little or no cross-reactivity towards norepinephrine,epinephine,isoprenaline,ractopamine,antibiotics and multi-vitamines added in feeds.The CL-Kit also showed fine precision and accuracy of assay in shelf life.As expected,the recoveries of CL spiked in pig urine were 91%-105%.The inter-assay coefficient variation was below 20%.The intra-assay CV was below 10%.

【基金】 河南省科技攻关重大项目资助
  • 【文献出处】 中国兽医学报 ,Chinese Journal of Veterinary , 编辑部邮箱 ,2004年01期
  • 【分类号】S859.79
  • 【被引频次】37
  • 【下载频次】321
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