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凋亡抑制因子survivin基因的克隆及在真核细胞中的表达

Cloning and expression of survivin gene in eukaryotic cells

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【作者】 闫歌蒲丹唐霓张秉强高小玲宋文鑫何通川黄爱龙

【Author】 YAN Ge,et al (Institute for Viral Hepatitis,Chongqing Medical University)

【机构】 重庆医科大学病毒性肝炎研究所Molecular Oncology Laboratory重庆医科大学病毒性肝炎研究所 重庆400010重庆400010The University of Chicago Medical CenterChicagoIL60637USA重庆400010

【摘要】 目的 :克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法 :RT -PCR扩增Survivin编码序列 ,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒 ,转染哺乳动物细胞 ,利用GFP绿色荧光和WesternBlot检测Survivin蛋白的表达。结果 :RT -PCR扩增出 4 2 1bp的Survivin编码序列 ,构建融合重组质粒pEGFP -C1-Survivin ,利用GFP荧光和WesternBlot证实Sur vivin蛋白的表达。结论 :成功克隆Survivin基因并在真核细胞中表达。

【Abstract】 Objective:To clone and express survivin gene in mammalian cells.Methods:Coding sequence of survivin gene was amplified from HepG 2 cell mRNA by RT-PCR and then cloned into eukaryotic vector pEGFP-C1.The vector with survivin gene was transfected into HepG 2 and SMMC-7721.The expression of survivin was detected by GFP and Western blot.Results:The recombinant plasmid pEGFP-C1-survivin was successfully constructed and expressed in HepG 2 and SMMC-7721.Conclusion:The result shows expression of the anti-apoptosis gene survivin in mammalian cells.

【基金】 国家自然基金资助 ( 3 0 3 715 99);国家杰出青年基金 (B类 )资助( 3 0 2 2 80 2 6)
  • 【文献出处】 重庆医科大学学报 ,Journal of Chongqing Medical University , 编辑部邮箱 ,2004年03期
  • 【分类号】R73-3
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】59
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