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农杆菌介导的细菌阿特拉津氯水解酶基因对水稻的遗传转化

Agrobacterium-rnediated Transformation of Rice (Oryza sativa L) with atzA Gene

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【作者】 王松文; 施利利; 孙宗修; 蔡宝立; 傅亚萍; 王扬; 斯华敏; 刘霞; 张欣;

【Author】 WANG Song-wen, SHI Li-li, SUN Zong-xiu, CAI Bao-li, FU Ya-ping, WANG Yang, SI Hua-min, LIU Xia, ZHANG Xin(Tianjin Agricultural College, Tianjin 300384; Key Laboratory for Rice Biology, Ministry of Agriculturel, China National Rice ResearchInstitute.Hangzhou 310006; Institute of Molecular Biology, Nankai University, Tianjin 300071; Key Laboratory for MolecularPhytophathology, Ministry of Agrculture, China Agricultural University .Beijing 100094)

【机构】 天津农学院; 中国水稻研究所/农业部水稻生物学重点实验室; 南开大学分子生物学研究所; 中国农业大学/农业部分子植物病理重点实验室; 天津农学院 天津 300384; 天津 300384 中国水稻研究所/农业部水稻生物学重点实验室; 杭州 310006; 天津 300071; 北京 100094; 天津 300384; 天津 300384;

【摘要】 研究构建了植物表达载体p1301-atzA,使来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因atzA受控于CaMV35s启动子下表达。用农杆菌介导法将植物表达载体p1301-atzA导入粳型保持系津稻107中,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再生植株。转基因植株总DNA经PCR和Southern检测表明atzA基因已整合到水稻的基因组中。对转基因植株进行除草剂阿特拉津抗性检测,在喷施浓度为0.133%的阿特拉津溶液后,对照植株和敏感植株死亡,而转基因植株表现出对阿特拉津的抗性,保持正常生长,但不同转化株系的抗性表达水平不同。对转基因植株T,代进行的遗传分析表明,外源基因atzA能稳定遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。

【Abstract】 Atrazine chlorohydrolase gene (atzA) was cloned from Arthrobacter sp. AD1. A plant expression plasmid was constructed under the control of CaMV35s promoter and was used in rice transformation. The target gene was successfully introduced into mature embryos of a Japonica rice cultivar Jindaol07 by Agrobacterium- mediated transformation and hundreds of transgenic plants were obtained. The exogenous atzA gene in the transgenic plants that expressed atrazine resistance was confirmed with PCR and Southern blot analysis. The resistance experiments by spraying transgenic rice plants with 0.133% atrazine shown that most of the transgenic rice plants exhibited the resistance to herbicide atrazine. The segregation of exogenous atzA gene in T progeny corresponded to the Mendelian ratio.

【基金】 天津市自然科学基金资助项目(013606611);天津市农业生物技术研究中心科技计划资助项目(003122011-4)
  • 【文献出处】 中国农业科学 ,Scientia Agricultura Sinica , 编辑部邮箱 ,2004年08期
  • 【分类号】S511
  • 【被引频次】30
  • 【下载频次】208
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