异源四倍体鲫鲤Sox9a基因保守区序列的克隆及内含子剪接位点分析

【摘要】 用特异于HMG box保守区的兼并引物扩增了异源四倍体鲫鲤及其原始亲本 (红鲫和鲤鱼 )的Sox基因 .异源四倍体鲫鲤的扩增产物共有 4条带 ,大小分别约为 2 0 0 ,6 0 0 ,90 0和1 90 0bp,而其原始亲本的扩增产物只有 3条带 ,且在雌雄个体中未发现性别特异扩增带 .回收雄性四倍体鱼 6 0 0bp扩增带 ,经亚克隆及测序分析得到一个新的编码 71个氨基酸残基的基因 .该基因与虹鳟鱼 (Oncorhynchusmykiss)、蟾蜍 (Xenopuslaevis)、鲤鱼 (Cyprinuscarpio)等的Sox9基因相似性达 97% ,据此命名为Atsox9a .通过计算机分析和RT PCR方法确定该基因含有内含子 ,并获得其内含子的序列和剪切位点 ,此内含子剪切位点在进化上是保守的 .Atsox9a对于研究异源四倍体鲫鲤性别决定和分化机制及脊椎动物性别进化具有重要的理论意义更多还原