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抗脂肪细胞特异膜蛋白单链抗体基因的克隆及序列分析

Cloning and sequence analysis of scFv gene

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【作者】 汪磊高士争张曦郝军元张玉静

【Author】 WANG Lei~(1), GAO Shi-zheng~(1), ZHANG Xi~(1), HAO Jun-yuan~(2), ZHANG Yu-jing~(2) (1. Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed of Yunnan Province, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201,China; 2. Department of Biochemistry, Quartermaster University of PLA, Changchun 130062,China)

【机构】 云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室中国人民解放军军需大学生化教研室中国人民解放军军需大学生化教研室 云南昆明650201云南昆明650201吉林长春130062吉林长春130062

【摘要】 从分泌抗 4 0ku脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取纯化mRNA ,经RT PCR扩增抗体轻、重链可变区基因 ,然后与Linker连接组装成单链抗体基因 (scFv)。结果 ,成功地构建了scFv基因 ,其排列方式为VH linker VL。经序列分析表明 ,scFv基因全长 74 1bp ,VH基因全长 36 9bp ,VL基因全长 32 7bp。抗脂肪细胞膜蛋白单链抗体基因的构建为进行该抗体基因的表达奠定了基础

【Abstract】 With the purified mRNA from hybridoma which secrete monoclonal antibodies against a 40 ku adipocyte plasma membrane protein, the VH (heavy-chain variable region) and VL (light-chain variable region) genes encoding the monoclonal antibody were amplified by RT-PCR, then they were joined with Linker for construction of scFv gene. The results showed that the scFv gene had been constructed in the way of VH-linker-VL. Sequence analysis demonstrated that length of the scFv gene was 741 bp and length of VH and VL genes was 369 bp and 327 bp respectively. The constructed scFv gene can be used to express the antibody.

【关键词】 脂肪细胞膜蛋白单链抗体序列
【Key words】 adipocyte plasma membranescFvsequence
【基金】 国家自然科学基金项目 (30 2 6 0 0 79)
  • 【文献出处】 中国兽医科技 ,Chinese Journal of Veterinary Science and Technology , 编辑部邮箱 ,2004年02期
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】74
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