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组蛋白-DNA共振光散射法的建立及应用

Study on resonance light-scattering of histene-DNA and its application

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【作者】 杜晓燕郑晶王保珍

【Author】 DU Xiao-yan,ZHENG Jing,WANG Bao-zhen.Public Health College of Harbin Medical University(Harbin 150001,China)

【机构】 哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室 哈尔滨150001哈尔滨150001哈尔滨150001

【摘要】 目的 建立灵敏度高、简单方便、试剂安全的共振光散射方法测定生物体DNA含量。方法 在 pH5 5的HAc-NaAc缓冲体系中 ,将组蛋白与DNA混合 ,在入射光波长和荧光波长相同条件下 ,用普通荧光分光光度计测定溶液的共振光散射强度 ;光散射强度与DNA浓度呈良好线性关系时测定核酸含量 ;应用该法检测鼠肝和酵母体内的DNA含量。结果 扫描光谱显示最大光散射波长为 5 5 1nm ,测定最佳条件为pH5 5 ;组蛋白用量 10 μg/ml。ctD -NA、fsDNA、hpDNA等 3种核酸均与光散射强度有良好线性关系 ,相关系数均大于 0 99。与常规分光光度法对照测定样品DNA含量 ,相对误差 <10 %。结论 该方法灵敏度优于常规方法 2~ 3个数量级 ,快速方便 ,适合于生物体内核酸含量测定

【Abstract】 Objective To establish a sensitive,simple and safe method for the determination of nucleic acid in living body.Methods In the acetic acid-sodium acetate buffer solution at pH5.5,on the basis of the measarement of the light-scattering from a complex formed by DNA and histone using a common spectrofluorometer,the DNA in mouse liver and yeast was measured.Results The optimum measurement for DNA was at the wavelength of 551?nm;pH5.5;histon of 10?μg/ml.The linear relationship between the light-scattering intensity(I\-\{RLS\}) and the concentration of nucleic acids was good(r>0.99).The agreement between the light-scattering measurement and the conventional spectrophotometric method was satis-factory(relative error <10%).Conclusion The method was more sensitive than conventional spectrophotometic method,qaick,convenient and reliable with little interference.

【关键词】 共振光散射DNA组蛋白生物体
【Key words】 resonance light-scatteringDNAhistoneliving body
【基金】 黑龙江省科学技术计划项目 (攻关 )基金资助(2 0 0 2 0 1 0 1 )
  • 【文献出处】 中国公共卫生 ,China Public Health , 编辑部邮箱 ,2004年06期
  • 【分类号】O657.3
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】89
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