快速纯化甲型肝炎病毒及相关性状的检测

【摘要】 甲型肝炎病毒(HAV)在宿主细胞的胞浆内增殖,很少释放到细胞培养的上清液中,因此,给病毒的纯化带来一定困难。本实验室针对制备甲肝诊断试剂盒所需大量病毒抗原问题,对提高抗原的收获率、浓度和纯度等方法进行改良,建立了以冻融、超声,聚乙二醇(PEG)浓缩,蔗糖/甘油不连续密度梯度离心为主要步骤的快速纯化HAV的方法,并对得到的纯化病毒样品进行相关的性状检测。现将结果报告如下。1　材料和方法1 1　材料　病毒原液由本所甲肝室提供,为H2 株HAV在人胚肺二倍体细胞(KMB17)培养中增殖4周左右后收获的感染细胞悬液,滴度为5 12～10 2 4EU/10 0 μl。抗HAV单克隆抗体由预防医学科学院病更多还原