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黄河蜜甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶基因片段的克隆和反义载体的构建

Molecular cloning of a muskmelon cDNA fragment encoding an amino-cyclopropane-1-carboxylie acid (ACC) synthase and construction of antisense expression vector

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【作者】 张永红张力群杨之为唐文华

【Author】 ZHANG Yong-hong~(1,2),ZHANG Li-qun~2,YANG Zhi-wei~1,TANG Wen-hua~2 (1 College of Plant Protection,Nothwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry,Yangling,Shaanxi 712100,China; 2 Department of Plant Pathology,China Agriculture University,Beijing 100094,China)

【机构】 西北农林科技大学植保学院中国农业大学植物病理系中国农业大学植物病理系 陕西杨凌712100中国农业大学植物病理系北京100094北京100094陕西杨凌712100北京100094

【摘要】 从伤诱导的黄河蜜甜瓜(Cucumismelocv.Huanghemi)成熟果实的中果皮组织中分离总RNA,经反转录和PCR扩增得到974bp的cDNA片段,克隆到质粒载体pGEM-3zf,经测序与Genbank中甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶(1-amino-cyclopropane-1-carboxylieacidsynthase,ACS)基因同源性为99%。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建成ACS基因的反义表达载体。

【Abstract】 A cDNA fragment of an amino-cyclopropane-1-carboxylie acid (ACC) synthase was amplified by Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) from wounded mesocarp tissue of mature muskmelon (Cucumis melo cv.Huanghemi) and cloned into a vector pGEM-3zf.DNA sequencing showed that the cloned fragment shared highly homogeneity to the cDNAs of ACC synthases from other Cucubitae plants.The cloned cDNA of ACC synthase was further introduced into a binary vector pBI121 in a reverse orientation with its upstream promotor (CaMV 35S),giving an expressing plasmid containing the antisense ACC synthase gene.

【基金】 澳大利亚国际农业中心项目(PHT/1998/140)
  • 【文献出处】 西北农林科技大学学报(自然科学版) ,Journal of Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry , 编辑部邮箱 ,2004年02期
  • 【分类号】S652.3
  • 【被引频次】13
  • 【下载频次】145
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