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SARS病毒S2基因的克隆、表达、纯化及其免疫学特性研究

The cloning,expression,purification and identification of SARS virus S2 gene and study on its immunological characteristics

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【作者】 董学员杨小昂李燕徐国宾冯珍如王月丹陈慰峰

【Author】 DONG Xue yuan 1, YANG Xiao ang 1, LI Yan 1, XU Guo bin 2, FENG Zhen ru 2, WANG Yue dan 1* , CHEN Wei feng 1* 1Department of Immunology, Health Science Center, Peking University, Beijing 100083; 2The First Hospital, Peking University, Beijing 100034, China

【机构】 北京大学医学部免疫学系北京大学第一医院北京大学医学部免疫学系 北京100083北京100083北京100034北京100083

【摘要】 目的 :在大肠杆菌中表达SARS病毒S2与硫氧还原蛋白 (Trx)的融合蛋白 ,并对其进行血清学鉴定。方法 :克隆编码SARS病毒S2蛋白的基因 ,并在原核表达系统中表达了 6×His S2硫氧还原融合蛋白。用Westernblot分析纯化Trx S2融合蛋白 ,分别与 6份SARS流行前的正常人血清和 6份SARS患者恢复期血清的反应性。结果 :Westernblot分析表明 ,6份SARS患者的恢复期血清均能识别Trx S2融合蛋白 ,且在Mr为 76× 10 3 附近出现特异性的结合带 ;而 6份SARS流行前的正常人血清则不与Trx S2融合蛋白起反应。结论 :本研究获得了纯化的SARS病毒Trx S2融合蛋白 ,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性结合反应 ,为研究SARS病毒感染宿主细胞的过程和制备针对SARS病毒的重组疫苗提供了条件。

【Abstract】 AIM: To express S2 protein of SARS virus fused with Trx and then detect its reactivity to the sera from convalescent SARS patients. METHODS: The Trx S2 fusion protein was expressed in E.coli . After purification, the Trx S2 fusion protein was detected by Western blot with 6 serum samples of convalescent SARS patients and 6 serum samples of healthy donors. RESULTS: According to the SDS PAGE analysis , the relative molecular mass ( M r) of the Trx S2 fusion protein is about 76×10 3. The fusion protein could react with all the sera from convalescent SARS patients but not with the sera from healthy donors. CONCLUSION: The Trx S2 fusion protein provides a basis for the research on its role in the course of SARS virus infection of host cells and preparation of recombinant viccine against SARS virus.

【关键词】 SARS病毒Trx-S2融合蛋白表达纯化
【Key words】 SARS virusTrx S2 fusion proteinexpressionpurification
【基金】 教育部SARS攻关基金 (2 0 0 3年度 );国家重点基础研究发展规划基金(973专项,No.2 0 0 3CB51 4 1 0 0);国家自然科学基金资助项目(No.30 340 0 1 1 )
  • 【文献出处】 细胞与分子免疫学杂志 ,Journal of Cellular and Molecular Immunology , 编辑部邮箱 ,2004年03期
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】12
  • 【下载频次】134
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