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EB病毒特异性增强子CAT报告质粒构建策略

Construction strategy of CAT reporter plasmids with Epstein-Barr virus specificity enhancer

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【作者】 廖志勇车小燕徐华张丽娅潘玉先郝卫

【Author】 LIAO Zhi-yong,CHE Xiao-yan,XU Hua,ZHANG Li-ya,PAN Yu-xian,HAO Wei Central of Laboratory,Zhujiang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou510282,China

【机构】 第一军医大学珠江医院中心实验室第一军医大学珠江医院中心实验室 广州510282广州510282广州510282

【摘要】 构建携带EB病毒特异性增强子oriP不同结构域的CAT报告质粒,以探讨EB病毒特异性增强子与EB病毒核抗原-1结合后的转录增强作用。聚合酶链反应扩增得到增强子oriP全序列,借助于pUC19质粒将其不同结构域克隆到pCAT3Promoter(pCAT3/P)载体。扩增获得oriP全序列;构建得到携带EB病毒特异性增强子Orip不同结构域的CAT报告质粒pCAT3/P-oriP、pCAT3/P-FR、pCAT3/P-DS、pCAT3/P-(FR+DS)等,质粒中目的基因的插入方向经鉴定正确。

【Abstract】 To construct CAT reporter plasmids with various domains of Orip and to discuss Epstein-Barr virus specificity enhancer’s role of enhancing the transcription after binding to Epstein-Barr virus nuclear antigen-1.The full enhancer se-quence of Orip was obtained with PCR and its various domains were cloned to pCAT3Promoter vector through pUC19plasmid respectively.The full sequence of Orip was obtained;plasmids such as pCAT3/P-Orip?pCAT3/P-FR?pCAT3/P-DS and pCAT3/P-(FR+DS)were constructed and the direction of inserted purpose genes were identified correctly.CAT re-porter plasmids with various domains of Orip are constructed successfully.

【基金】 国家自然科学基金重大国际(地区)合作研究(30120160823);国家基金项目(C030310);广东省自然科学基金重点项目(020100);广东省自然科学基金项目(010637);全军“十五”科研基金项目(01MA135)
  • 【文献出处】 生物技术通讯 ,Letters in Biotechnology , 编辑部邮箱 ,2004年03期
  • 【分类号】Q785
  • 【下载频次】39
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