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金属硫蛋白-3对dUTPase调节dUTP细胞毒性作用的影响

Affection of Metallothionein-3 to dUTPase’s Accommodating Cellular Toxicity of dUTP

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【作者】 陈巧林康巧华任宏伟王宗元茹炳根

【Author】 CHEN Qiao-Lin 1 KANG Qiao-Hua 1 REN Hong-Wei 1 WANG Zong-Yuan 2 RU Bing-Gen 1* 1(Department of Biochemistry and Molecular Biology, College of Life Sciences, Peking University, National Laboratory of Protein Engineering, Beijing 100871, China) 2(College of Animal Husbandy and Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

【机构】 北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室扬州大学畜牧兽医学院北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室 北京100871北京大学人民医院风湿免疫科北京100044北京100871扬州225009北京100871

【摘要】 金属硫蛋白 3(MT 3) ,又称神经生长抑制因子 ,是一种脑特异性金属硫蛋白。人细胞核dUTP焦磷酸酶(dUTPpyrophosphatase,dUTPase)是最近在脑中研究发现的能与人金属硫蛋白 3(humanmetallothionein 3,hMT 3)相互作用的一个蛋白 ,两者共同作用具有神经元生长抑制活性。为了探讨hMT 3对dUTPase调节dUTP引起的细胞毒性作用的影响 ,通过基因转染HEK2 93细胞观察细胞在dUTP中的生长情况 ,发现共转染hMT 3和dUTPase基因的细胞比单转染dUTPase或hMT 3基因的细胞具有更强的对dUTP细胞毒性的耐受能力 ;同时在大肠杆菌BL2 1中表达重组蛋白 ,测定hMT 3在dUTPase水解dUTP中的作用 ,结果显示重组蛋白hMT 3可以促进dUTPase对dUTP的水解。结果均初步证实了hMT 3对dUTPase抵抗dUTP引起的正常细胞死亡有一定的协同作用 ,为进一步研究dUTPase及其相互作用蛋白hMT 3在化疗中的应用提供理论依据。

【Abstract】 Metallothionein-3(MT-3), renamed as growth inhibitory factor(GIF), is a brain specific member of the metallothionein family. Human dUTPase is a recently found protein in brain that can interact with hMT-3. They have the growth inhibitory activity on neuron cell by interaction. To study the affection of hMT-3 to dUTPase’s eliminating the cellular toxicity caused by dUTP, the pSVHA-dUTPase and pFLag-hMT-3 genes have been transfected into HEK293 cells. In addition, the dUTPase and hMT-3 proteins were expressed in BL21 to study the role of hMT-3 on the hydrolyzation of dUTP by dUTPase. The results demonstrate that the cells co-transfected with dUTPase and hMT-3 genes have more strong resistibility to dUTP than the cells transfected only with dUTPase gene. And that the hMT-3 protein can accelerate the hydrolyzation of dUTP by dUTPase. All these indicate that hMT-3 can cooperate with dUTPase to protect better the 293 cells from dUTP. This research offered the theoretic elements for the application of hMT-3 and dUTPase in chemic cure.

【关键词】 hMT-3dUTPase基因转染dUTP细胞毒性
【Key words】 hMT-3dUTPasegene transfectiondUTPcellular toxicity
【基金】 国家 95攻关合同项目基金资助 (No .96 C0 2 0 1 0 9)~~
  • 【文献出处】 生物工程学报 ,Chinese Journal of Biotechnology , 编辑部邮箱 ,2004年03期
  • 【分类号】R73-36
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