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石蜡包埋肺癌组织DNA提取方法的改进

DNA extraction from paraffin-embedded lung cancer tissue and PCR

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【作者】 陈启龙聂刘旺王洋彭巧玲

【Author】 CHEN Qi-long, NIE Liu-wang, WANG Yang, PENG Qiao-lingCollege of Life Sciences, Anhui Normal University,Wuhu 241000,P.R.China

【机构】 安徽师范大学生命科学学院安徽师范大学生命科学学院 安徽芜湖241000安徽芜湖241000安徽芜湖241000

【摘要】 目的 :探讨从保存肺癌标本中提取基因组DNA的改良方法。方法 :石蜡包埋肺癌组织在二甲苯脱蜡后 ,先用PBS缓冲液 (设立pH值梯度 ) 60℃温浴处理 4~ 8h ,接着用不同梯度乙醇处理 ,最后再用PBS缓冲液常温处理 4~ 8h。结果 :用PBS缓冲液预处理比直接用乙醇梯度处理所获得的DNA质量要高 ,且pH值在 7 5~ 8 5时最佳 ,PCR扩增产物长度可达 675bp左右。结论 :保存时间较长的标本用偏碱性 (pH值 7 5~ 8 5 )PBS缓冲液预处理 ,能提高其DNA质量

【Abstract】 OBJECTIVE:To extract the genomic DNA from preserved specimen and apply it for molecular research.METHODS:After being taken off paraffin wax with xylene from paraffin-embedded lung cancer tissue, first the tissue was infused into PBS buffer for 4-8 hrs in water bath, the temperature was 60℃, then handled with different concentration of alcohol.RESULTS:Long DNA fragment was acquired by this method, and higher yields of DNA were got at pH 7.5-8.5.The PCR products amounted to 675 bps.CONCLUSIONS:Long DNA fragment can be acquired from the PBS buffer (pH 7.5-8.5) pretreatment preserved specimen.It is important for molecular research of sample DNA.

【基金】 安徽省优秀青年科技基金 ( 2 0 0 2 );安徽省自然科学基金 ( 0 10 43 2 0 2 );安徽省教育厅自然科学基金重点项目( 2 0 0 1kj113zd)
  • 【文献出处】 肿瘤防治杂志 ,Journal of Qilu Oncology , 编辑部邮箱 ,2004年04期
  • 【分类号】R734.2
  • 【被引频次】12
  • 【下载频次】223
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